资源描述：
《糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因fgl2mRNA表达的影响_姜.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、DOI：10.13193/j.archtcm.2010.12.20.jiangdy.036第28卷第12期中华中医药学刊Vo.l28No.122010年12月CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEDec.2010糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因fgl2mRNA表达的影响1111111姜德友,郭加利,刘春红,柳成刚,王兵,白玉宾,谢颖,11123李阳光,淡平平,李富震,R.PAULFETHERSTON,WilliamG.vonPeters(1.黑龙江中医药大学,黑龙
2、江哈尔滨150040;2.美国威斯康辛大学实验中心;3.美国自然疗法和综合科学第一国立大学)摘要:目的:比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Evegreen实时荧光RT-PCR技术定量检测凝血酶原酶(fgl2mRNA)在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法:(1)差异表达基因的筛选;(2)荧光定量RT-PCR的检测。结果:本文仅对筛选出差异表达基因谱中的fgl2mRNA进行报告。糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因fgl2mRNA表达上调,中药复方糖心康治疗组心肌组织基因fg
3、l2mRNA表达下调。结论:fgl2mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。关键词:糖心康;糖尿病;心肌损伤;fgl2mRNA中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1673-7717(2010)12-2482-02糖尿病心肌损伤系糖尿病(DM)常见慢性并发症之用预冷的生理盐水冲洗,冲洗后在冰上操作,沿心室长轴切一,其病变可以是原发的,也可继发于冠状动脉供血障碍,取心肌,置于液氮中冻存,以备提取
4、RNA使用。且心肌病变出现较早,主要表现为心肌舒张和收缩功能障2心肌组织差异表达基因的筛选碍,易发生充血性心力衰竭。其确切的病理机制尚未彻底2.1总RNA提取阐明,临床尚无特效药物,而中医药在防治该病方面很有潜从各组大鼠中取心脏,使用QIAGEN.sRNAeasyTotal力,但因其病理机制复杂,其状态的描述和中药复方多成RNAIsolationKit抽提总RNA,由纯化的总RNA合成双链分、多环节、多靶点的作用机制,又是传统单因素研究理论cDNA,经PLG提取、乙醇沉淀将双链cDNA纯化,用BioAr-与方
5、法难以解决的,为此借助分子生物学研究方法,采用基rayHighYieldRNATranscriptLabelingKit方法以生物素标因芯片技术,利用目前国际学术界公认的Affymetrix公司生记cRNA合成,QIAGENRneasyColumns法体外转录纯化生产的Rat2302.0基因芯片,寻找糖尿病心肌病相关基因,物素标记的cRNA,用分光光度计分析RNA浓度进行质控,探讨糖尿病心肌病分子生物学机制,阐释中药复方糖心康凝胶电泳检测IVT产物,片断化cRNA,合成cRNA探针。治疗糖尿病心肌病的作用机理
6、,对STZ诱导DM大鼠的心2.2基因芯片的杂交洗脱染色及检测脏基因表达谱进行了研究,并对筛选出的差异表达基因用合成好的cRNA探针经片段化处理后用于与基因芯片Evegreen实时荧光RT-PCR技术检测其在大鼠心脏组织杂交。基因芯片为AffymetrixRat2302.0基因表达谱芯片,中的含量及表达水平,本文仅报告糖心康对糖尿病心肌病芯片的杂交、洗脱、染色及检测利用Affymetrix公司生产的大鼠心肌组织基因fgl2mRNA表达的影响。专用设备/基因芯片检测工作站0(workstation)进行,操作1材
7、料与方法过程均按该公司推荐的条件进行。1.1主要试剂和药品2.3基因芯片检测数据的处理链脲佐菌素(STZ,CALBIOCHEM,USA);糖心康为黑芯片扫描数据应用/AffymetrixMicroarraySuitesoftware龙江中医药大学附属第一医院制剂室制作;Rat2302.0基5.00进行数据处理。因芯片(AFFYMETRIX,USA)。2.4结果1.2动物造模及分组筛选标准说明:差异基因筛选标准为change为I或Wistar大鼠,雄性,体重200~230g,除空白对照组外,-1MI,ratio
8、>或=1,实验组Detection为P的为上调基因,余者以25mg#kgSTZ左下腹腔注射,造膜成功后,再随change为D或MD,ratio<或=-1,对照组Detection为P中机分为模型组和治疗组。各组均喂以高热量饲料。华的为下调基因。1.3给药方法中散点图X轴为对照组信号值,Y轴为实验组信号值,图医治疗组以中药糖心康灌胃,空白组及模型组以生理盐药中红色点为实验组和对照组该基因的Detect
