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《脂质体干扰素的体外抗乙型肝炎病毒效应(1).pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、临床肝胆病杂志1997年2月第13卷第1期脂质体干扰素的体外抗乙型肝炎病毒效应黄耀芳章廉胡俊王燕军骆杭先2.2.15细胞进行脂质体干扰素与干扰素(IFN)的体外抗乙型肝炎病毒(H,提要本文采用BV)实验用,,,,ELlsA法测HBeAg用反向血凝法及ELISA法测HBsAg用斑点杂交法测HBvDNA结果证实脂质体,,,s。IFN体外对HBeAg的抑制率较IFN高能较好地抑制HBvDNA但与IFN一样对HBAg无抑制作用类祖词脂质体干扰素干扰素乙型肝炎病毒抗HBV效应。为阐明脂质体IFN对乙型病毒性肝炎G
2、IBCO公司产品..、,2:的治疗价值本文采用215细胞进行脂质二方法...,12:体IFN与IFN的体外抗HBV实验探讨脂215细胞培养法常规使用DMEM,,1%质体IFN能否保持或超过相同剂量的IFN培养基另加10%小牛血清青。u,,的体外抗HBV效应链霉素(PGi000o/mlSMi000拼g/ml)及,a:.,G一418并用NHCO调培养液pH至72材料和方法,用EDTA一胰酶混合液消化3一4天换液一一、:,。试剂次14一18天传代一次1.2.2.15细胞为HePG:细胞转染了2.脂质体的合成与
3、脂质体IFN的制作,。:.:HBV的传代肝癌细胞系由国外引进方法将卵磷脂和胆固醉按144以重量.a,,2重组干扰素一2b(lFN一26)系美国比)溶于乙醚于旋转蒸发器中将乙醚抽干Schering一plough,,生产使其成膜贴壁再加IFN水溶液于无菌条.。-3卵磷脂针剂系上海油脂一厂产品件下振荡成脂质体包裹的IFN。.。4胆固醇为广州化学玻璃仪器厂产品3.脂质体IFN、IFN及脂质体的体外抗.,5DMEM培养基为美国GIBCO产品HBv效应实验法:‘’.1009,....每粉剂溶于l000ml蒸馏水中用
4、2215培养液标本收集法;2215¹将3..apH7072,epes,NHCO调整至一加H使Zx,细胞铺种于24孔细胞培养板每孔lo.som,0。其浓度为M以20拼m微孔滤膜正压个细胞第一行每孔加入脂质体(4mg/而)与一。。,过滤除菌后20℃保存IFNI。万制成的脂质体IFN第二行每郊.6,56,小牛血清购自军科院℃水浴加入10万uIFN第三行每孔加入4mg/ml‘。..30灭活,,脂质体第四行为2215细胞对照每孔补.一:7Genetin(G418)购自美国Sigma公lml,N、加培养液至即实验分
5、为脂质体扭组,,ees..司取lgG一418溶于lmlIM之Hp液、2IFN组脂质体组及215对照组;分三次,,,。中加蒸馏水至loml过滤除菌4℃保存做,分别于2.2.15细胞传代后第六天、第八、se8.HBAgHBAg的ELISA检测试剂,,天及第十天加药每次做三个平板即重复三。盒由本实验室提供,以后每两天分别收集一次细胞液,一℃次409.斑点杂交试剂盒为德国贮存。。BOEHRINGER公司产品ELIsAº用法测所收集的培养液中.一10PenieillinGStreptomyein。为美国HA,Bs
6、g及HBeAg水平按说明书进行»用斑点杂交法测培养液中HBV:,。作者单位510516第一军医大学南方医院DNA按说明书进行临床肝胆病杂志1997年2月第13卷第1期:阳性孔OD值P/N值一结果结果判定阴性孔OD值对照孔P/N一实验孔P/N、e抑制率二.只100%一ELISA法测培养液之HBAg对照孔P/N一2112.2.15细胞第六天加药后对eAg抑(%)表HB制率的比较加药后天数24681012脂质体IFN74.1855.2429.4328.9125.2021.11......、4227IFN261
7、72363171923301510脂质体12.3011.086.909.813.804.8022.2.巧细胞第八天加药后对eAg(%)表HB抑制率的比较加药后天数24681012脂质体IFV25.3222.8022.7122.0618.4717.73IFN14.4017.9210.4412.849.16脂质体8.074.078.945.594.607.12表32.2.15细胞第+天加药后对HBeAg抑制率的比较(%)加药后天数246810脂质体IFN47.2037.5230.0026.8329.68IF
8、N30.5924.9624.8624.071537脂质体3,623.3312.9213.552.13:,..、、,尸<,。,注以上三表的抑制率经配伍组的方差分析。05两两比较P均<05即脂质体IFNIFN脂质体之间对HBeAg抑制率有显著区别。,..。SA法测2215培养液之时增加其生物学活性〔们另外用ELI.,..HA,,p022Bsg经配伍组的方差分析>05即本文用15细胞进行脂质体IFN与、、,脂质体IFNIFN脂质体之间对HBsAg
