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《丹参有效部位对骨折愈合过程中胶原基因表达的影响费.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国中西医结合杂志年月第卷第期·实验研究·丹参有效部位对骨折愈合过程中胶原基‘因表达的影响史炜摈符诗聪杜宁张凤华张昊内容提要目的观察丹参有效部位对骨折愈合过程中前胶原、转化生长因子队皿基因表达模式的影响,分析促进骨折愈合作用的分子机理。方法健康成年大鼠只,作双侧挠骨骨折模型,随机分成组、阳性对照药三花接骨散组三花组和空白对照组空白组,分别以、三花接骨散,、、,和生理盐水灌胃给药米后天周周和周后处死大鼠取材采用不脱钙的大鼠,。,骨痴组织冰冻切片进行原位杂交观察骨痴组织中前胶原和基因的表达结果骨折后第天组,。与三花组的骨折端的表达明显高于空白组并已出现班型胶原基
2、因的表达骨折,成纤维细胞和软骨细胞样细胞的型前胶原基,组与三花组、工型前胶原第周末因表达占主导与基。,工型前胶原表达明显增加,因的表达较空白组呈同步增强趋势骨折第周末组,。和三花组中肥大软骨细胞明显多于空白组型前胶原的表达呈现显著的衰落趋势同时证实共有表型表达现象的存在,尤。,以组与三花组更为明显骨折第周末软骨骨痴基本被骨组织替代。组和三花组骨组织替代更趋完全,偶见型前胶原表达阳性的成骨细胞和肥大软骨细胞。结论与,以促进阳性对照药三花接骨散均可调节骨折愈合过程中有关前胶原基因的表达骨折愈合,此作用可能与其对月墓。因表达的调控有关关键词丹参有效部位骨折愈合原位
3、杂交前胶原,,,,,,‘,人加介以乞肥日,,,川,川,,,日,川,一,一,川,,,川,川,,本课。题受国家自然科学基金资助上海第二医科大学附属瑞金医院上海市伤骨科研究所上海中国中西医结合杂志年月第卷第期,,川,,,,,,丹参作为活血化疲的要药,其促进骨折愈合的机剂盒,方法参照试剂盒所附说明。理已得到体内、体外的组织学、组织化学及超微结构实原位杂交采用非同位素标记原位杂交,“。,’验研究的证实自年我们又对丹参作了促进杂交及显色检测均采用公司骨折愈合有效部位的筛选,并确定了一个有效部位标记检测试剂盒,方法参照试剂盒所附说明及有,‘’。骨计量学检测待发表资料以及生
4、物力学关文献杂交阴性对照设立杂交液中不加标记检‘显示可明显增加骨折处成骨细胞数。测探针杂交前以处理切片,,。量促进类骨质的矿化提高骨折端的力学强度本研结果究采用不脱钙的大鼠骨痴组织冰冻切片进行原位杂‘”,,交观察丹参有效部位对骨折愈合过程中骨折后第天组与三花组的骨折端血肿前胶原以及转化生长因子日基因表达的影响,中,的表达明显高于空白组,并出现班。。以在分子水平上揭示上述作用机制型胶原基因的表达,在骨折第周末骨主要由未完全机化的肉芽材料与方法、组织软骨骨痴以及部位沿骨折端骨膜下形成的编织动物模型与组织切片制作健康成年骨组成,此时型前胶原基因的表达占主导地位,杂
5、交大鼠只,体重士,中国科学院上海实验动阳性颗粒广泛出现于肉芽组织的成纤维细胞样和软骨,,物中心提供作双侧挠骨骨折模“,随机分成丹参有。,型细胞样间充质细胞中同时型前胶原基因、,效部位组组三花接骨散组三花组和空白也开始在骨折端骨膜下编织骨中的成骨细胞中出现对照组空白组,每组只,分别以、三花接骨型前胶原则在细小的软骨岛内的软骨细胞。、、。、散和生理盐水灌胃给药术后天周周和周中有较高的表达表达在分化增殖中的成骨,,,,后处死取材每次每组只血肿和骨痴组织取下后细胞以及接近成熟的软骨细胞内较为明显在,,水配制的磷酸缓冲液冲去血迹迅速置液组和三花组中尤为明显与前胶原基因
6、的表达较空白,,,胖。氮内冻存然后在冰冻切片机上作的连续冰冻组呈同步增强趋势,,切片置预先硅化的涂有多聚赖氨酸的载玻片,,上质量骨折第周末软骨骨痴占据骨折区的大部并有分数为的多聚甲醛含蔗糖的质量浓度,部分软骨细胞趋向肥大软骨特异性胶原型前的,室温下固定,洗胶原与探针的杂交阳性颗粒在成熟—的软骨细,。,,次各质量浓度为的室温下作胞中密集出现在肥大的软骨细胞中则较少出现在,一,用质量分数为作用组和三花组中肥大软骨细胞明显多于空白组,。含质量分数为甘氨酸的室温下孵育型前胶原的表达也呈显著的衰落趋势软,,,蛋白酶消化,含质量分数为甘骨基质中尤其在组和三花组的软骨基质
7、中,一,氨酸的室温下再孵育一些肥大软骨细胞内出现工型前胶原基因的表达即洗次,各巧,逐级酒精脱水,空气干燥。所谓的共有表型表达现象。而,探针的制备有关前胶原基因探针的工型前胶原的表达则明显增加在软,,,质粒型和型骨内化骨和再塑建中的膜内化骨区中达高峰尤其是型〕,均由芬兰大学惠赠,合成方法在软骨内化骨前沿的成骨细胞中。在进一步‘’。,参照有关文献俘寡核昔酸探针的探针序列扩大的软骨小岛内的软骨细胞中持续高表达尤其在,由合成仪合组和三花组中。。,成标记采用公司标记试骨折第周末在空白组中软骨骨痴基本被骨组中国中西医结合杂志年月第卷第期,,,织替代可见散在的型前胶原表达
8、阳性的成进骨折愈合方面除了先前研究所揭示的作用机制外
