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1、临床肿瘤学杂志2010年11月第15卷第11期ChineseClinicalOncology,Nov.2010,Vo.l15,No.11!1037!循环肿瘤细胞的检测及其在乳腺癌患者中的临床应用1215006江苏苏州苏州大学附属第一医院肿瘤科马德亮综述,陶敏审校摘要由于循环肿瘤细胞(circulatingtumorcel,lCTC)能够反映肿瘤侵袭与转移,检测CTC也就在成为肿瘤界研究的热点。外周血CTC非常少,仅能通过肿瘤特异性抗原来检测。本综述主要介绍了CTC的富集、检测过程、常用标记物及其在乳腺癌患者中的临床应用。关键词循环肿瘤细胞;检测;乳腺
2、癌中图分类号:R7379文献标识码:A文章编号:1009-0460(2010)11-1037-04DetectionofcirculatingtumorcellsanditsclinicalrelevanceinbreastcancerMADeliang,TAOMin.DepartmentofOncology,theFirstHospitalAffiliatedtoSoochowUniversity,Suzhou215006,ChinaCorrespondingauthor:TAOMin,Email:mtao@medmail.com.cnAbstractCir
3、culatingtumorcellsarethoughttoreflecttumoraggressivenessandmetastases,whosedetectioncausessomuchinterestingofresearchersintheworld.Butcirculatingtumorcellsinperipheralbloodarerarewhichcanbedetectedonlybyusingspecificallymarkers.Thisreviewaddressestheenrichmentanddetectionstepsandthemarkersofcircu
4、latingtumorcellsusedintheliterature,alsoincludingitsuseinbreastcancer.KeyWordsCirculatingtumorcells;Detection;Breastcancer循环肿瘤细胞(CTC)被定义为从肿瘤原发病灶或转移system)方法是通过免疫磁珠结合的单克隆抗体进行细胞富病灶进入外周血的肿瘤细胞。虽然CTC在外周血中所占比集的专用仪器。磁珠可以结合到上皮性抗体如EpCAM上,例很小,但已有临床研究证实乳腺癌患者CTC的数量与无进EpCAM是一种涉及细胞间粘附、在上皮性恶性肿瘤高表达展生存期(p
5、rogressionfreesurviva,lPFS)及总生存期(overall的细胞表面分子。抗体介导的梯度离心富集肿瘤细胞是通[12]surviva,lOS)相关联。本文综述了在CTC相关文献里所过阴性选择来完成,借助红细胞抗体四聚体复合物,CD45可用到的检测方法,包括细胞富集、细胞检测、肿瘤标记物三部以结合到红细胞表面,在密度离心后,这些非目的细胞成分分及CTC检测在乳腺癌患者中的临床应用价值。将沉积在离心管底部,CD45阴性的单核细胞在分离液或者[3]血浆中可得到再次分离。1CTC的检测12检测技术11富集方法121细胞计数方法细胞计数方法是通过肿瘤细胞表面
6、111以形态学为基础的富集方法ISET(isolationbysize抗原如针对上皮特异性抗原的单克隆抗体来完成的。该方ofepithelialtumorcells)是根据肿瘤细胞体积大小(肿瘤细胞法中肿瘤细胞未被破碎掉,与以核苷酸为基础的方法相比能的体积一般都大于8m)用膜滤过的方法把肿瘤细胞从外周够进一步目测确认肿瘤细胞,具有CTC形态学上的可识别血细胞中分离出来。密度梯度离心技术是根据单核细胞比性。FAST(Fiberopticarrayscanningtechnology)方法用免疫其它血细胞的密度要小从而进行离心分离:用1077g/ml的荧光标记的单克隆抗体来识别CT
7、C,在玻片上用免疫荧光标密度梯度可以把单核细胞和肿瘤细胞从其它血细胞中分离记抗体来标记肿瘤细胞。LSC(laserscanningcytometry)能对出来。已标记荧光细胞进行扫描识别,全血中红细胞被裂解后用[45]112免疫磁珠分选最简单的分选是应用免疫磁珠结合HEA和CD45复合染色,再用LSC进行计数。比较免疫的单克隆抗体来富集肿瘤细胞。血细胞阴性选择可应用结磁珠联合LSC、膜滤过联合LSC及多标记物定
