造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠的筛选.pdf

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1、2011年5月中国比较医学杂志May，2011第21卷第5期CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEVol．21No．5殝檵檵檵檵殝檵檵殝研究报告檵檵檵檵殝造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠的筛选张晓娟，李小颖，施海霞，葛文平，梁虹，张连峰(中国医学科学院，北京协和医学院，医学实验动物研究所，卫生部人类疾病比较医学重点实验室，国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室，北京100021)【摘要】目的对五种荧光转基因小鼠造血干细胞中的荧光标记细胞进行分析，筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠，为造血干细胞分化机制体内示踪研

2、究提供理想的动物模型。方法采用活体荧光影像系统对两种红色荧光转基因小鼠品系C57BL/6J-TgN(CAG-DsRed-1和CAG-DsRed-2)ZLFILAS和三种绿色荧光转基因小鼠品系C57BL/6J-TgN(CAG-EGFP-1、CAG-EGFP-2和CAG-EGFP-3)ZLFILAS的荧光标记进行比较;采用流式(－)(+)+细胞术检测各转基因小鼠的骨髓linc－kitSca-1(LSK)造血干细胞荧光标记细胞比率，根据标记比率筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠。结果活体荧光影像分析表明转基因小鼠均系统性表达红色或绿色荧光。流式细胞术检测表明L

3、SK造血干细胞中高度表达红色和绿色荧光，其中，C57BL/6J-TgN(CAG-DsRed-1)ZLFILAS和C57BL/6J-TgN(CAG-EGFP-1)ZLFILAS的造血干细胞全部为荧光标记细胞。结论筛选获得在造血干细胞中全标记的红色和绿色荧光转基因小鼠，可为造血干细胞体内研究提供有效示踪工具。【关键词】红色荧光蛋白;绿色荧光蛋白;转基因;造血干细胞;小鼠【中图分类号】R349.83;R332【文献标识码】A【文章编号】1671-7856(2011)05-0014-04doi:10．3969/j．issn．1671．7856．2011．05．004Sel

4、ectionofTransgenicMouseModelswithTotallyLabeledFluorescenceinHematopoieticStemCellZHANGXiao-juan，LIXiao-ying，SHIHai-xia，GEWen-ping，LIANGHong，ZHANGLian-feng(KeyLaboratoryofHumanDiseaseComparativeMedicine，MinistryofHeath;InstituteofMedicalLaboratoryAnimalScience，ChineseAcademyofMedicalS

5、ciences;KeyLaboratoryofHumanDiseasesAnimalModels，StateAdministrationofTraditionalChineseMedicine;BeijingUnionMedicineCollege，Beijing100021，China)(－)(+)+【Abstract】ObjectiveTocomparedtheratiosoffluorescencelabelingcellstothelinc-kitSca-1(LSK)stemcellsfromthefivetransgenicmouselines，sele

6、ctedthemouselinesoftotallyfluorescencelabeled，fortrackingthehematopoieticstemcellsandinvivofluorescenceimaginganalysis．MethodsTheexpressionsofthefluorescentproteininvivowereobservedunderinvivofluorescenceimagingsystem，theexpressionofthosegenesinthestemcellswereinvestigatedwithflowcyto

7、metry．ResultsThefluorescentproteinwasexpressedinmosttissuesinthefivetransgenicmice．ThefluorescentproteinexpressionswereobservedinalmostallLSKstemcellsofC57BL/6J-TgN(CAG-DsRed-1)ZLFILASandC57BL/6J-TgN(CAG-EGFP-1)ZLFILAS．ConclusionsTwotransgenicmouselineswereindicatedinwhichLSKstemcells

8、werem