快速微乳电动毛细管色谱法同时测定忍冬藤中11中有效成分含量(10产地)

《快速微乳电动毛细管色谱法同时测定忍冬藤中11中有效成分含量(10产地)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、快速微乳电动毛细管色谱法同时测定忍冬藤中11种有效成分含量△﹡曹君尼锟潭叶诗佳李乐君王鹏远成小兰刘庆焕葛晓小李彬李萍(中国药科大学现代中药教育部重点实验室,南京210038)摘要建立了简单、快速且能同时分离测定忍冬藤中马钱子苷、当药苷、绿原酸等11种有效成分含量的微乳电动毛细管色谱法。该法运行缓冲液由3%SDS+0.6%正庚烷+6%正丁醇及90.4%硼酸缓冲溶液组成；未涂层石英毛细管柱（50μm×60cm）；运行电压30kV；柱温25℃；检测波长为254nm；50mbar（3s）压力进样。忍冬藤中11种有效成分在13min内分离良好，线

2、性范围内r≥0.9980，所测有效成分的日间和日内精密度RSD均<3%（n=6），平均加样回收率在70.4～107.1%之间。该方法简便、快速、结果准确可靠，可作为忍冬藤及其制剂的质量控制方法。关键词忍冬藤，环烯醚萜苷，黄酮，有机酸，微乳电动毛细管色谱1引言忍冬藤为忍冬科植物忍冬（LonicerajaponicaThunb.）的干燥茎枝,产于我国大部分地区。忍冬藤具有清热解毒、[1]疏风通络之功效,用于温病发热、热毒血痢、痈肿疮疡、风湿热痹、关节红肿热痛。现代药理研究表明忍冬藤具有抗炎、抗肿瘤、预防和治疗肝纤维化、止血、抗病毒等功效。[

3、2][3,4]关于忍冬藤质量评价分析研究的文献报道，主要方法有分光光度法、高效液相色谱法。本研究为了更好的开发利用忍冬藤，充分发挥其药用价值，采用快速的微乳电动毛细管色谱法同时分离测定了忍冬藤药材中的马钱子苷、当药苷、绿原酸等11种有效成分。在优化的实验条件下，上述11个成分能被完全分离测定。本实验方法简便、快速，为忍冬藤的质量控制提供了有效的分析方法。2实验部分2.1仪器与试剂AgilentG1600A毛细管电泳仪（DAD检测器、控温装置、自动进样器），HP工作站（美国安捷伦）；未涂层石英毛细管(60cm×50μm,i.d.,河北永年

4、锐丰色谱器件有限公司),有效长度为51.5cm;pHS-4A型pH计(上海雷磁仪器厂);HS3120型超声波提取器（淮阴汉邦科技有限公司）。对照品：马钱子苷(1)、当药苷(2)、secologamin(3)、木犀草苷(4)、dimethy-secologamoside(5)、芦丁(6)、异槲皮苷(7)、金丝桃苷(8)、、绿原酸(9)、异绿原酸(10)、木犀草素(11)、毛蕊异黄酮苷(内标)，上述对照品除金丝桃苷和绿原酸购自中国生物制品检定所外，其余均为本实验室从忍冬藤样品中分离（经UV、MS和NMR鉴定，纯度[5-9]＞98.0％），内

5、标选用毛蕊异黄酮苷，忍冬藤样品分别采自湖南长沙、安徽亳州、浙江杭州、香港、河南郑州、广东深圳、河南封丘等，经实验室李萍教授鉴定为忍冬科植物忍冬(LoniceraJaponicaThunb.)的藤，甲醇为色谱纯(Merck公司)。其它化学试剂均为分析纯（南京化学试剂厂）。超纯水由Milli-Q系统制备(Millipore,Bedford,MA,USA),2.2对照品贮备液的配制分别精确称取对照品马钱子苷0.94mg、当药苷1.03mg、secoxyloganin1.32mg、木犀草苷0.69mg、dimethy-secologamosid

6、e0.86mg、芦丁0.96mg、异槲皮苷1.01mg、金丝桃苷0.90mg、绿原酸1.72mg、异绿原酸1.31mg、木犀草素1.01mg，分别置于1mL容量瓶中，加入1.0mL50%甲醇溶解，即得对照品贮备液，摇匀，备用。精确称取毛蕊异黄酮苷2.07mg，加入1mL50%甲醇溶解，摇匀，配制成含毛蕊异黄酮苷2.07g/L的内标溶液。2.3供试品溶液的配制精确称取忍冬藤药材粉末（过250um筛）约0.5g，至具塞锥形瓶中，加入10mL50%甲醇，称定重量，超声45min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足重量，摇匀，滤过。再经0.22

7、μm微孔滤膜过滤,精密吸取0.5mL，本文系国家基础科学人才培养基金,项目号：J0630858。﹡E-mail:liping2004@126.com,△对本论文和第一作者有同等贡献。加入2.07g/L20μL内标溶液，作为供试品溶液。2.4实验方法运行缓冲液由3%SDS+0.6%正庚烷+6%正丁醇及90.4%硼酸（10mmol/L，pH9.0）缓冲溶液组成,经超声30min制备而成。所有溶液使用前均用0.22um微孔滤膜过滤。新毛细管依次用1.0mol/LNaOH、0.1mol/L、水分别洗10min。使用前再用0.1mol/LNaOH

8、、水、背景电解质溶液(BGE)各洗10min。两次进样间用0.1mol/LNaOH、BGE再洗2min。分析进样两次更换一次BGE溶液。采用压力进样：50mbar，3s；运行电压30kV；柱温25℃;检测波