微生物感染的病原学实验室诊断分析前.ppt

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1、病原微生物送检是感染控制的基础微生物分析前微生物分析前步骤包括样本的选择、取样和转运，其重要性经常被低估。进行样本取样的人往往对微生物检测影响因素知道得最少。改进分析前流程不仅可以节省花费，更重要的是提高病人护理质量。提供最佳的微生物病原菌发现率，使污染率降至最低及培养结果容易判读。提升实验室工作效率及病患照顾质量降低医疗成本需要不需要检验项目申请标本采集指南特殊安全防护特殊安全防护处理病人识别、评估标本采集标本标签标本转运标本接收标本拒收标本储存标本唯一标识微生物实验室分析前处理流程图正确采集、转运

2、与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率，是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步。WhoisresponsiblefortheSpecimencollection?微生物标本采集过程中临床医师和护士标本采集前，临床医师须考虑的问题：是否感染？细菌感染？真菌感染？还是病毒、寄生虫感染？何时采集样本？采集什么样的标本？怎样采集？样本是否足量？采用哪种无菌容器或运送培养基采集标本？完善的填写标本申请单，尤其是针对某些特殊致病菌的排查要求；（申请单信息越详尽，越有助于实验室出具符合临床情况的

3、结果报告，如疑似诊断、准确的取材部位、甚至取样时用抗生素。）可参考微生物室提供的标本采集要求手册！需要临床医师采样的标本类型：肺泡灌洗液或纤支镜刷片标本腹腔引流液或穿刺液脑脊液前列腺液骨髓感染部位组织生殖道标本采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低！护士在采集标本中担负的责任：核对医师送检申请向接受采样的患者提供简要声明为标本规范粘贴条码或手写标记及时和规范采样迅速安排标本运送至实验室或在规定时间范围内按要求妥善保管标本（危急值标本应即时送检）；记录标本采样信息；强传染性标本应有专用送检容器和警示标

4、签（HIV、HCV、结核分枝杆菌……）采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低！护士采样的标本类型：尿液粪便痰和拭子伤口分泌物血培养……注意防止标本被污染或者造成患者机会感染！采样人员应接受专门培训，严格参考微生物室提供的标本采集要求进行采样！标本采集的要求1，在用药前采样；2，按照采样规则要求，选择正确的采样部位、采样容器、及采样量；2，采样后及时送检，不能及时送检的须按规定采取运送培养基或按规范温度在一定内时间保存，否则重新采样；3，采取严格的无菌操作方式采样，避免标本被污染，或造成患者的院内感染

5、；4，综合多种检查信息，正确看待微生物培养结果，多与微生物实验室交流；5，应对所有采样人员进行正规培训。入选前抗生素使用情况对致病菌分离率的影响P<0.05标本采集部位非无菌部位无菌部位眼血液耳骨髓呼吸道脑脊液肠胃道胸水泌尿道腹水皮肤关节液毛发痰（Sputum）痰液通常作为下呼吸道细菌感染的标本。痰液是一个由支气管分泌物和炎性渗出物组成的混合物，通过口腔咳出。不管是采集合适的标本，还是解释培养出的结果都存在难点。因为繁忙和技术不够熟练或未接受培训的人员可能会错误的采集和送检唾液到实验室。通常需要反复送检

6、痰培养，来确认真正的致病株。标本质量带血痰唾液or诱导痰(?)脓痰粘液样痰革兰氏染色——所有微生物检验的开端Gram-Gram+WhatAmI?GramStaining革兰氏染色的意义1.判断标本的合格性；2.标本菌群初始状态的确立与培养条件的选择；3.致病菌的初步判断；4.与培养结果互相对照,提高检验准确性；5.初步报告，为临床快速药物选择和处理提供辅助意见；手工染色方法影响因素：1，脱色时间；2，涂片的质量；3，干燥和固定4，细菌菌龄、用药后等形态变异5，染液沉渣；6，交叉污染；7，接触感染性标本，

7、危险性试剂应用特点全封闭系统（清洁、安全）一机两用，革兰染色＋细胞离心快速5分钟内得到标准化结果高通量设计，每小时可处理120/300张涂片雾化喷嘴，降低试剂用量（满盘。12通量）清洁、快速、经济自动化染色仪手工染色标准、清洁、安全痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收标本质量评估－痰涂片Garbagein！！有PMN的痰标本，且鳞状上皮细胞特别少=接受，进行培养粘液丝细胞内吞噬细菌肺炎-可接受的不合格标本评述很少的鳞状上皮细胞<10个每低倍视野许多鳞状上皮>10个/低倍视野可以在玻片上看到许多鳞状

8、上皮细胞，说明在采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。很多的中性粒细胞很少有或没有中性粒细胞免疫抑制的病人也会出现中性粒细胞减少中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养很多中性粒细胞混合有形态多样的细菌（革兰氏阴性杆菌，纺锤形，革兰氏阳性球菌）吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断的方法。许多或中等量的中性粒细胞，以一种形态的细菌为主酵母菌样，酵母菌是一种很少引起肺炎的细菌，常由口腔污染