细菌感染的病原学诊断ppt课件

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1、第三章细菌感染的病原学诊断褚云卓7/5/20211本章内容第一节标本的采集和处理原则第二节细菌的形态学检查第三节细菌的分离培养和鉴定第四节细菌的非培养检测方法7/5/20212第一节标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则1．早期采集2．无菌采集3．根据目的菌的特性用不同的方法采集4．采集适量标本5．安全采集7/5/20213第一节标本的采集和处理原则二、标本的处理1.对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检2.其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室3.若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存

2、4.一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h7/5/20214５.病人标本中可能含有大量致病菌，必须注意安全防护６.标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出７.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须按规定包装，由专人运送８.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送7/5/20215第二节细菌的形态学检查1.包括不染色标本检查法和染色标本检查法2.镜检可以了解有无细菌及大致的菌量3.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类4.通过形态学检查

3、可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义7/5/20216第二节细菌的形态学检查二、染色标本（一）常用染料1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等2．酸性染料：有伊红、刚果红等3．复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料有瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等；荧光染料有荧光标记的抗体7/5/20219第二节细菌的形态学检查（二）常用的染色方法1．革兰染色（gramstain）革兰阳性球菌革兰阴性杆菌7/5/202110第二节细菌的形态学检查2．抗酸染色（acid-faststain）可将细菌分为两大类：即-抗酸性

4、细菌-非抗酸性细菌7/5/202111第二节细菌的形态学检查3．荧光染色（1）荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。（2）主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。7/5/202112第二节细菌的形态学检查4.鞭毛染色可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中很重要。5.异染颗粒染色用于白喉棒状杆菌染色。7/5/202113第二节细菌的形态学检查6.芽胞染色：绿色部分为芽胞7/5/202114第二节细菌的形态学检查7.墨汁染色:一般用

5、于新型隐球菌检查7/5/202115第三节细菌的分离培养和鉴定一、培养基的种类和选择培养基的组成成分、培养基种类、培养基的选择二、分离及培养细菌的分离、细菌培养方法三、生化反应和鉴定碳水化合物的代谢试验蛋白质和氨基酸的代谢试验碳源和氮源利用试验7/5/202116第三节细菌的分离培养和鉴定一、培养基的种类和选择培养基（culturemedium）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。7/5/202117第三节细菌的分离培养和鉴定(一)培养基的组成成分1．营养物质蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、无机盐类

6、、鸡蛋和动物血清生长因子2．凝固物质琼脂、明胶、卵白3．抑制剂和指示剂7/5/202118第三节细菌的分离培养和鉴定（二）培养基种类1．基础培养基（basedmedium）2．营养培养基（nutrientmedium）3．鉴别培养基（diferentialmedium）4．选择培养基（selectivemedium）5．特殊培养基（specialmedium）7/5/202119第三节细菌的分离培养和鉴定1．基础培养基含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤（broth），主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。7/5/20212

7、0第三节细菌的分离培养和鉴定2．营养培养基（nutrientmedium）最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等7/5/202121第三节细菌的分离培养和鉴定3．鉴别培养基（diferentialmedium）糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-镁蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。7/5/202122第三节细菌的分离培养和鉴定4．选择培（selectivemedium）SS琼脂使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到7/5/202123第三节细菌的分离培养和鉴定5．特殊培养基（specialmedium）疱肉培养基、巯基乙醇酸纳培

8、养基7/5/202124第三节细菌的分离培养和鉴定（三）培养基的选择根据标本来源和可能存在的病原菌，确定选用各种分离培养基。伊红美蓝/麦康凯用于筛选革兰阴性杆菌。7/5/202125第三节细菌的分离培养和鉴