【毕业设计-医学论文】vegf和e-cadherin在胃癌中的表达及意义.doc

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1、VEGF和E-cadherin在胃癌中的表达及意义作者：罗秉庆，郑绍光，唐青梅，龚广【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和钙粘附分子(E-cadhcrin,E-cad)在胃癌中的表达及意义。方法应用核酸原位杂交方法检测62例胃癌组织屮VEGF和E-cadmRNA表达情况。结果62例胃癌中VEGF和E-cadmRNA阳性表达率分别为90.32%(56/62)和32.26%(20/62),VEGFmRNA在胃癌中的阳性表达率显著高于正常胃粘膜上皮组织;E-cadmRNA阳性表达率显著低于正常胃粘膜上皮组织(P【关键词】胃肿瘤；肿瘤转移;血管内皮生长因子;钙粘附分子；原位杂交Abstra

2、ct：ObjectiveToassayvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andE-cadherin(E-cad)expressionandoutlinetheirclinicalsignificances.MethodsAsituhybridizationwasusedtodetecttheexpressionofVEGFandE-cadmRNAin62patienlswithstomachcancer.ResultsThepositiveratesofVEGFandE-cadmRNAin62sampletissuesofstomachcancerw

3、ere90.32%(56/62)and32.26%(20/62).TheVEGFmRNAstainingwasmorestronginstomachcancercellsthannormalgastricmucosci,andtheE~cadmRXAstainingwasweaker(PKeywords：stomachneoplasms;neoplasmmetastasis;vascularendothelialgrowthfactors;E-cadherin;insituhybridization癌的侵袭转移是多阶段的复杂过稈，肿痫新生血•管的形成和细胞粘附系统的崩溃导致癌细胞脱离母癌是

4、始动侵袭转移的关键［1,2］。血管内皮生长因子(VEGF)能促进新生血管的形成，肿瘤新生血管的形成在为肿瘤细胞生长提供养分时，也为肿瘤侵袭转移创造了条件，而肿瘤新生血管一且被启动，便会无限制地增生且不受机体制约［3］。鈣粘附分了(E-cMherin)代表一组参与细胞间或细胞与基质间作用的细胞表面分了，其表达丧失会导致肿瘤细胞脱离癌灶，启动转移和浸润［4］。我们应用核酸原位杂交技术，检测胃癌屮VEGF和E-cadmRNA的表达水平，探讨它们对胃癌生物学行为的煤响及临床病理意义。1材料和方法1.1材料收集柳州医专一附院及柳州市肿瘤IK院病理科2000〜2005年资料完整的胃癌标木62例，其屮男

5、41例，女21例，年龄33〜72岁，平均53.5岁。所有患者术前均未接受化疗和放疗。术后经病理明确诊断，其屮高分化腺癌3例，屮分化腺癌24例，低分化腺癌27例,粘液腺癌(含印戒细胞癌)8例。TNM分期:T1期6例,T2期11例,T3期27例,T4期18例，有淋巴结转移38例，无淋巴结转移24例。以20例癌旁正常胃粘膜上皮组织为对照。1.2核酸原位分了杂交(insituhybridization,ISH)切片经二甲苯脱蜡入水,50yg/ml蛋白酶K消化,经4%多聚甲醛0.lmol/LPBS（pH7.4）固定lOmin,0.lmol/LPBS（pII7.4）摇洗5minX3次，暴霸mRNA核酸

6、片段，预杂交后，川地高辛随机引物标记寡核廿酸探针VEGF、E-cad杂交，再滴加生物素化地高辛检测系统，DAB显色。VEGF和E-cad探针、探针标记及原位杂交试剂盒均购自武汉博士徳公司，探针标记、杂交、杂交后检测程序按试剂盒说明书进行。杂交时设不加探针和不加抗辣根过氧化物酶抗体的对照片作为阴性对照，用已知阳性片作为阳性对照。L3结果判断杂交阳性信号为棕黄色颗粒，定位于细胞质。根据染色强度及显色细胞比例，将染色结果分为：阴性（一）、阳性（+）、强阳性（++）。①按切片屮细胞有无显色及深浅评分：无显色为0分，棕黄色为1分，棕褐色为2分。②根据显色细胞的比例评分：<30%为1分，30%〜70%

7、为2分，>70%为3分。以上2种评分Z和为每例的积分。按积分高低分为：0分为阴性（一），1〜3分为阳性（+）,4〜6分为强阳性（++）。1・4统计学处理计数资料采用％2检验，由SPSS10.00版本统计软件处理。2结果2.1VEGF、E-cadmRNA在正常胃粘膜上皮和胃癌不同病理分型屮的表达见表1。VEGF、E-cadmRNA阳性定位于胞质（见图1、图2）。VEGFmRNA在正常胃粘膜上皮呈阴性表达，在胃癌屮的阳性表达