临床医学毕业论文烧伤对不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白的影响.doc

《临床医学毕业论文烧伤对不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白的影响.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、XX大学毕业论文烧伤对不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白的影响2014年6月25日烧伤对不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白的影响作者：郭晓强，郭佩，张彩云，刘卫【摘要】ri的研究不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白烧伤前后的变化。方法90C水蒸气制备烧伤小鼠模型，采用比色法测定烧伤小鼠肝脏和脾脏屮的铁含量，逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测肝脏hepcidin和膜铁转运蛋白l(Fpnl)表达，使用Western检测了肝脏和脾脏Fpnl蛋白表达。结果烧伤后雄性小鼠脾脏铁含量升高，肝脏hepcidin表达升高同时肝脏和脾脏Fpnl蛋口含量减少。烧伤后雌

2、性小鼠铁内稳态破坏程度较轻。结论铁相关蛋白的表达变化可能是引起烧伤后铁内稳态破坏的重要原因，不同性别小鼠铁相关蛋白表达差界可能暗示了雌激索的保护作用。【关键词】烧伤铁hepcidin膜铁转运蛋白ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethechangesofironrelatedproteinsindifferentsexmicebeforeandafterbums.MethodsThebummodelinmicewerepreparedwith90°Cvapor.Bothliverandspleenironcontent

3、sweremeasuredbycolorimetricmethod・HepatichepcidinandFpnlmRNAcontentweredeterminedwithRTPCR.TheFpnlproteinwasdeterminedwithWesternblot.ResultsAfterbums,thecontentofspleenironwasincreasedandtheexpressionofhepatichepcidinwasdecreasedinmalemice,andatthesametimetheFpnlofliverands

4、pleenwasreduced.Thecontentofironhomeostasisabnormalityinfemalemicewaslessserious.ConclusionThechangeofironrelatedproteinsafterbumsmaybeonecauseofironhomeostasisabnormality.Thedifferencesofironrelatedproteinexpressionindifferentsexafterbumssuggestthatestrogenhasapotentiallypr

5、otectivefunction.KEYWORDS:bum;iron;hepcidin;ferroportin1铁是生物生长和发育所必需的元素Z—，其缺乏可造成贫血和细胞凋亡[1]。烧伤性贫血是一种炎症性贫血，是严重烧伤的常见并发症，常见临床特征包括贫血、血清铁含量下降、巨噬细胞铁滞留等[2],这是由于烧伤引起的炎症反应可破坏机体铁的内稳态。H前已发现多种与铁内稳态相关蛋白，如hepcidin[3]>膜铁转运蛋白1(ferroportin1,Fpn1)、转铁蛋白受体1(transferrinreceptorl,TfRl)等[4],这些蛋口共同调

6、节了机体铁的内稳态。前期研究已确定hepcidin在烧伤性贫血发生过程11*发挥着重要作用,而本实验n的在于进一步确定烧伤对铁相关蛋白及组织铁含量的影响，另外还确定烧伤对不同性别小鼠铁代谢影响的差异。1材料与方法1.1动物与试剂2刀龄KM小鼠(清洁级)购自河北省实验动物屮心，体重25〜27g,雌雄各半；试剂亚铁嗪(fcrrozinc)>Trizol试剂盒、AMV逆转录酶、PCR引物、DEPC等均购自上海生工生物工程技术有限公司，小鼠Fpnl一抗为AlphaDiagnostic公司产品，TfRl一抗为invitrogen产品，actin—抗为Si

7、gma生产，HRP标记的羊抗小鼠二抗购自北京屮山金桥，发光底物为Pierce公司产品，其他试剂为国产分析纯。1・2烧伤模型小鼠的制备将12只小鼠先雌雄分开，然后1/2雌雄小鼠进行烧伤处理，另外1/2作为对照。先对所有小鼠背部使用Na2S进行脱毛处理(面积占体表总面积30%),12h后对烧伤组小鼠裸露处用90°C水蒸气处理15s,基本达到深II度和III度烧伤，对照组小鼠使用室温蒸憾水处理相同时间。处理完毕后对所有小鼠禁食(减少肝糖原)，但保留水供应。12h后将所有小鼠处死，取脾脏和肝脏备用。1.3小鼠肝脏和脾脏铁含量的测定参照文献[5]并做适半

8、修改。称取10mg干燥肝脏或脾脏组织并研碎，将其溶于lOOmL盐酸和300mL/L三氯酷酸混合液（1:1）,随后使用超声处理（10s,3次），95°C