海参加工废弃液中多糖及其组分的分析与回收.pdf

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1、第25卷第5期2010年10月大连海洋大学学报JOURNALOFDALIANOCEANUNIVERSITYV01．25No．50ct．201O文章编号：1000—9957(2010)05—0434—05海参加工废弃液中多糖及其组分的分析与回收赵前程，刘先琳，李智博，何云海，李伟，汪秋宽(大连海洋大学ft．宁省水产品加工及综合利用重点开放实验室，辽宁大连I16023)摘要：以海参加工废弃液为原料，分析了经酶解处理和未经酶解处理的海参加工废弃液中多糖及其组分含量的变化；采用酸醇沉结合法沉淀回收多糖及其组分，并与醇沉法进行了比较。结果表明：在适宜的酶解处理条件下，

2、即采用中性蛋白酶，加酶量为5％、酶解时间为6h，经酶解处理后的海参加工废弃液中，多糖及其组分氨基糖、糖醛酸、岩藻糖和硫酸基含量较未经酶解处理的分别提高85．O％、37．2％、30．O％、65．4％和4．5％；采用等体积(乙醇体积为50％)醇沉法回收的多糖及其组分氨基糖、糖醛酸、岩藻糖和硫酸基的总回收率分别为28．9％、7．3％、19．6％、13．O％和38．8％；采用酸醇沉结合法(先酸沉再分级醇沉)，当乙醇体积为30％时，多糖及其组分氨基糖、糖醛酸、岩藻糖和硫酸基的总回收率分别为82．2％、92．1％、93．1％、96．0％和91．7％，当乙醇体积为50％时

3、，多糖及其组分的总回收率分别为83．8％、93．2％、93．6％、96．4％和92．1％。可见，用酸醇沉结合法回收的多糖及其组分的总回收率远高于单一醇沉法，而且采用30％的乙醇醇沉回收多糖就能达到很好的效果。关键词：海参；加工废弃液；多糖；组分；回收；醇沉；酸醇沉中图分类号：TS201．4文献标志码：A海参Holothurians属于软体动物门海参纲，被列为“海产八珍”之一。干海参中蛋白质的含量占有机成分的90％、多糖占6％以上uJ。随着人们对海参多糖研究工作的深入，海参多糖新的生理活性被不断发现口J。研究表明，海参多糖中含有相当丰富的岩藻聚糖归‘5J，还含

4、有硫酸基、糖醛酸及氨基糖等多糖组分H。6J。海参多糖是蛋白质与岩藻糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖聚合而成¨J。海参中有大量的蛋白质存在，给提取海参多糖带来了困难，因此在提取海参多糖时，一般采用酶法进行处理¨’3。P-io]，或者结合碱法去除蛋白b】，然后采用醇沉法回收多糖。目前大多采用加入一定体积的乙醇直接提取多糖¨’5“．8。10

5、，纯化时，常采用Sevag试剂或者三氯乙酸等去除蛋白，但这又会导致多糖损失‘8‘12】，并且对多糖组分也有影响¨2l。蒸煮是海参加工的重要环节之一，在海参加工蒸煮废弃液中会存在数量可观的多糖和蛋白质等营养成分。目前，鲜见从海参加工废

6、弃液中回收多糖的文献报道。因此，建立经济有效的海参加工废弃液多糖回收方法对提高海参加工企业的经济效益和产品附加值、减少污染物排放具有现实意义。本研究中，作者以海参加工废弃液为原料，分析了经酶解处理和未处理的海参加工废弃液中多糖及其组分含量的变化，并采用酸醇沉结合法沉淀回收多糖及其组分，旨在为海参加工企业提供一种经济有效的回收多糖的方法。1材料与方法1．1材料与试剂海参加工废弃液，由大连晓芹海参食品有限公司提供。中性蛋白酶(酶活力60000U／g)为天津市科密欧化学试剂开发中心生产；岩藻聚糖硫酸酯为Sigma公司生产；D一葡萄糖醛酸(GIcUA)为沃凯公司生产

7、；D一(+)一氨基葡萄糖(Glc．N1)为Solarbio公司生产；牛血清蛋白为北京奥博星生物技术有限责任公司生产。乙醇、硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、氢氧化钠、D一葡萄糖、苯酚、3，5一二硝基水杨酸、丙三醇、明胶、氯化钡、咔唑、次甲基蓝、乙酰丙酮、碳酸钠、对二氨基苯甲醛等试剂均为国产分析纯。试验所用仪器主要有可见分光光度计、冷冻离心机、pH计等。收稿日期：2009一ll一17作者简介：赵前程(1966一)，男，博士，副教授。E—mail：qczhao@hotmail．com第5期赵前程，等：海参加工废弃液中多糖及其组分的分析与回收4351．2方法1．2．1指标测

8、定及计算方法采用苯酚一硫酸法一。测定总糖；采用3，5一二硝基水杨酸比色法：”’测定还原糖。采用次甲基蓝比色法u41测定岩藻聚糖硫酸酯含量；采用明胶BaCI：法¨纠测定硫酸基含量；采用9一氮杂芴比色法(咔唑比色法)¨钊测定糖醛酸；采用Elson—Moran法¨刊测定氨基糖。多糖含量以及多糖或其组分回收率的计算：多糖=总糖一还原糖，多糖或其组分回收率=(多糖或其组分回收量／海参废弃液中多糖或其组分含量)×100％。1．2．2试验设计1)海参加工废弃液的预处理取一定量的海参加工废弃液，静置6h，然后以4000r／min离心30min，去杂质，并测定废弃液中粗多糖及

9、其组分岩藻聚糖、硫酸基、糖醛酸、氨基糖的含量。2)海