实验细菌的芽孢荚膜染色.ppt

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1、实验六细菌芽孢、荚膜的染色及观察7/25/20211一、目的1、学习并掌握芽孢染色法；2、初步了解芽孢杆菌的形态特征；3、学习并掌握荚膜染色法。7/25/20212二、基本原理芽孢染色法的基本原理是：用着色力强的染色剂在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍然保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱、不易着色；通常用衬托染色法染色

2、。使菌体和背景着色，而荚膜不着色，在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。7/25/20213三、器材1、菌种枯草芽孢杆菌约2d营养琼脂斜面培养物；固氮菌约2d无氮培养基琼脂斜面培养物；2、染色剂5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶液，绘图墨水、95%乙醇、石炭酸复红染液等；3、仪器或其他用具木夹子、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸等7/25/20214四、操作步骤1、细菌的芽孢染色涂片、干燥、固定孔雀绿水溶液染色5～7min水洗番红水溶液染2min、水洗、干燥、镜检。2、细菌的荚膜染色涂片自然干燥1～2滴9

3、5%乙醇固定石炭酸复红染液染色1～2min，水洗，自然干燥加墨水，涂层，自然干燥，镜检。7/25/20215荚膜染色的涂片方法7/25/20216细菌的芽孢7/25/202177/25/202187/25/202197/25/202110五、实验报告1、绘图表示芽孢杆菌的形态特征（注意芽孢的形状、着生位置及芽孢囊的形状特征）；2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和荚膜的形态；3、通过荚膜染色法染色后，为什么被包在荚膜里面的菌体着色而荚膜不着色？7/25/202111放线菌的形态观察。霉菌的形态观察。六、预习7/25/202112