溴百里酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究.pdf

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1、第22卷第1期化学研究与应用Vo1．22。No．I2010年1月ChemicalResearchandApplicationJan．，2010文章编号：1004—1656(2010)01-0018-06溴百里酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究周享春，颜昌琪，颜承农(长江大学化学与环境工程学院，湖北荆州434023)摘要：在模拟动物体生理条件和不同温度下，用荧光光谱和紫外．可见吸收光谱法研究了溴百里酚蓝(BTB)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的光谱行为。用Stem．Volmer和Lineweaver—Burk方程分别处理试验数据，发现BSA与BTB发生反应生成了新的复合物，属于静

2、态荧光猝灭。求出了反应时复合物的形成常数墨(2．792X10’L·tool)、热力学参数(△=．20．24kJ·tool～，AS。=37．22J·K～，Ac。=．31．25kJ·mol)与结合位点数(1．1578)。根据Ffirster偶极-偶极非辐射能量转移理论计算出结合位置距离212位色氨酸残基2．60rim。证明二者主要靠静电作用力结合。同时用同步荧光光谱和三维荧光光谱法探讨了BTB对BSA构象的影响。表明BTB使色氨酸残基所处微环境的极性减弱、疏水作用增强，为阐明BTB的染色机理、毒理效应和生物学效应提供重要信息。关键词：溴百里酚蓝；牛血清白蛋白；荧光猝灭光谱；三维荧光

3、光谱；热力学参数中图分类号：0629．73文献标识码：AStudyontheinteractionofbromothymolblueandbovineserumalbuminZHOUXiang-chun‘，YANChang-qi，YANCheng-nong(ColegeofChemistryandEnvironmentalEngineering。YangtzeUniversity，Jingzhou434023，China)Abstract：Undersimulatedphysiologicalconditionsofanimalsandatvarioustemperatures

4、．tIlebindingreactionofbromothymolblue(BTB)tobovine~：rnmalbumin(BSA)wasstudiedbyfluorescencespectrumw~andultra-violetspectrumspectroscopy．ThefluorescencequenchingdatawereanalyzedaccordingtoStern-VolmerequationandLineweaver—Burkdouble-reciprocalequation．Studieshaveshown：BSAhadreactedwithBTBand

5、formedacertainnewcompound，thequenchingbelongedtostaticfluorescencequenching．Theformationconstantsofthecompound(2．792X10L·tool-I．)，thethermodynamicparameters(AH。=-20．24kJ·tool～，AS。=37．22J·K～，AG。=-31．25．o9kJ·tool)andthenumberofbindingsites(1．1578)wereobtained．BasedontheFfirster’Stheoryofnon-ra

6、diationenergytransfer，thedistancebetwenbindinglocalityandtryptophanresidue-212wasP．．60nm．Itshowsthatthebindingpowerbetweenthemismainlytheelectrostaticactingforce．TheefectofBTBontheconformationofBSAwasanalyzedbysynchronousfluorescencespectraandthree—dimensionalfluorescencespee~a．Itindicatesth

7、atthepolaritymieroenvironmentaroundTrpresiduesdecreased，hydrophobicforcesincreased．Theseprovideimportantinformationforenucleatingthedyeingmechanisms、thetoxicityeffectsandbiologiealeffectsofBTB．Keywords：bromothymolblue；bovineserumalbumin；fluorescenc