微乳毛细管电泳在线扫集技术同时分离测定尿酸共存物.pdf

《微乳毛细管电泳在线扫集技术同时分离测定尿酸共存物.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、专业管理微乳毛细管电泳在线扫集技术同时分离测定尿酸共存物林夏邹联佳周丹丹（广西卫生职业技术学院，广西南宁532000）摘要：本文建立了一种毛细管扫集技术与微乳电动色谱联psi（3447.5Pa）压力进样。用的在线富集分析技术（Sweeping-MEEKC），并对黄嘌呤2结果与讨论（Xan）和次黄嘌呤（HX）进行了定量分析。实验中，考察了样品2.1样品基质的影响介质种类、进样时间、样品介质中乙腈浓度对富集效果的影实验选取7种不同的微碱性电解质溶液作为黄嘌呤和次黄响。结果显示，sweeping扫集的

2、最佳操作条件是：将样品溶解至嘌呤的溶解介质。当样品溶解在氢氧化钠溶液中时，黄嘌呤和10mmol/LNaOH溶液中，0.7psi，压力进样50s。该条件下，黄次黄嘌呤分离度和峰型均较良好。嘌呤和次黄嘌呤的富集倍数分别为23倍和26倍，线性范围均2.2盐浓度的影响为0.1~10μg/mL。该方法应用于痛风病人尿液样品中黄嘌呤有文献报道高盐浓度毛细管扫集技术可以在MEKC分离和次黄嘌呤的分析，回收率范围分别为93.16~96.51%和94.37模式中获得良好的富集效果[2,3]。实验以NaCl作为高盐

3、电解~98.41%。所建立的在线富集分析方法，无需对样品进行复杂质，在50~150mmol/L范围内考察其对富集效果的影响。结果前处理，即可满足人尿液样品中黄嘌呤和次黄嘌呤的分析表明，本实验的MEEKC分离条件下，NaCl的加入使富集效果变定量。差。因此实验选择不添加NaCl至溶解样品的溶液中。关键词：微乳；毛细管；在线扫集2.3乙腈浓度的影响尿酸经常被用作疾病诊断的临床指标，人体液中的尿酸常实验在2.5%~15%（体积比）范围内考察样品介质中乙腈[1]与黄嘌呤、次黄嘌呤、抗坏血酸共同存在。文献

4、1中建立了一含量对富集效果的影响，结果表明在0%~10%浓度范围内对种检测人血浆及尿液样品中的MEEKC方法，对尿酸进行定量，富集效果影响不大；当浓度为15%时，黄嘌呤变为肩峰。实验获得的结果令人满意。但无法对这两种嘌呤化合物进行定选择不添加乙腈至样品的溶解基质中。量。毛细管电泳在线扫集技术是一种操作简单、经济实用的在实验最终优化出的sweeping扫集条件为：将样品溶液10线富集技术。本文将扫集技术与MEEKC联用，建立一种检测mmol/LNaOH溶液中，压力进样方式，0.7psi(4827.

5、6Pa)，进样微量黄嘌呤及次黄嘌呤的在线富集检测方法，有望为黄嘌呤及50s。次黄嘌呤的临床研究提供一种辅助手段。2.4方法评价1实验部分检测6个浓度水平（0.1、0.5、2.5、5、7.5、10μg/mL）的黄嘌呤1.1仪器与试剂和次黄嘌呤标准品溶液得出标准曲线。黄嘌呤和次黄嘌呤的P/ACETMMDQ毛细管电泳仪，PDA检测器;熔融石英毛细线性范围均为0.1-10μg/mL，在范围内线性良好，相关系数R2管，内径75μm，总长度50.2cm，有效长度40cm。在0.9978-0.9992范围内；

6、检出限分别为0.01，0.0075μg/mL；定尿酸、黄嘌呤、次黄嘌呤、抗坏血酸、水杨酰胺标准品购自量限分别为0.075,0.075μg/mL，富集倍数分别为23倍和26倍。美国sigma公司，聚氧乙烯月桂醚（Brij-35）、四硼酸钠（硼砂）、参考文献：氢氧化钠、氯化氢、正丁醇、乙腈、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、碳[1]XiaLin,YufeiWang,JinyuSun,DanXiao,WeiLuoand酸氢钠、醋酸钠、醋酸钙均为分析纯，实验用水为色谱用去离HuiLi.Determinationo

7、furicacidinhumanplasmaandurineby子水。microemulsionelectrokineticchromatography.Anal.Methods,1.2电泳实验过程2013,5,5201-5207.运行缓冲溶液：80mmol/LBrij-35，2%（体积比）正庚烷，[2]J.Palmer,N.J.Munro,J.P.Landers,AUniversalConcept14%（体积比）正丁醇，2.5%（体积比）乙腈，10mmol/L硼砂（pHforstackingn

8、eutralanalytesinmicellarcapillaryelectrophoresis9.25）。新毛细管使用前分别用纯甲醇、1.0mmol/LHCl、1.0[J].Anal.Chem.71(1999)1679-1687.mmol/LNaOH和去离子水各冲洗20min，每天实验前毛细管用[3]J.P.Quirino,S.Terabe,P.Bocek,Sweepingofneutralana⁃0.5mmol/LNaOH、去离子水反向冲洗5min，两次运行之间，毛lytesinelectr