CE法测定CD45-FITC荧光抗体溶液中的游离FITC.pdf

《CE法测定CD45-FITC荧光抗体溶液中的游离FITC.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第27卷第11期化学研究与应用Vo1．27．No．112015年11月ChemicalResearchandApplicationNov．，2015文章编号：1004—1656(2015)11—1666-05CE法测定CD45一FITC荧光抗体溶液中的游离FITC薛洪宝，张晖，李柏青，梁丽丽，陶兆林(1．蚌埠医学院化学教研室，安徽蚌埠233030；2．蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室，安徽蚌埠233030)摘要：建立了测定CD45一FITC荧光抗体样品溶液中游离FITC浓度的毛细管电泳(CE)方法。熔融石英毛细管45cm

2、(有效长度30em)x75mi．d．；0．05mol·L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(含5g·L～PEG4000，pH=7．14)；分离电压+l2kV；进样压力0．5psi(3．45kPa)，进样时间3．0S；分离温度25℃；UV—Vis检测器检测波长200nm。该方法能有效测定CD45一FITC荧光抗体样品溶液中游离的FITC含量，线性回归方程相关系数r=0．9900，检测限LOQ=0．20tzg·mL。。。样品加标回收率为105．49％，相对标准偏差小于5．36％。该方法快速、灵敏、重现性好，能用于CIM5一FITC荧光

3、抗体样品溶液中游离FITC的快速测定。关键词：毛细管电泳法(CE)；CD45一FITC荧光抗体；游离FITC中图分类号：0657．8文献标志码：ADeterminationoffreefluoresceinisothiocyanateinCD45一FITCfluorescentantibodyby、capillaryelectr0ph0resisXUEHong．bao，ZHANGHui，LIBai—qing，LIANGLi．1i，TAOZhao．1in(1．DepartmentofChemistry，BengbuMedica

4、lCollege，Bengbu233030，China；2．AnhuiKeyLaboratoryofInfectionandImmunity，BengbuMedicalCollege，Bengbu233030，China)Abstract：Arapidcapillaryelectrophoresis(CE)methodwasdevelopedforthedeterminationoffreefluoresceinisothiocyanate(FITC)inCD45一FITCfluorescentantibodysolutio

5、n．TheanalyseswerecarriedoutonaCEsystemequippedwithanUV—VisdetectorandaPDAdetector．Separationwasperformedinabarefused—silicacapillaryof45．0cmlong(30．0emtothedetector，75txmi．d．)at25℃，anda0．05mol·L～disodiumhydrogenphosphate—sodiumdihydrogenphosphatebuffersolution(cont

6、aining5g·IPEG4000，pH：7．14)wasusedasbackgroundelectrolyte．Thesampleswereintroducedintothecapillaryunderapressureof0．5psi(3．45kPa)for3S，andtheseparationvoltagewassetat+l2kV．Thedetectionwavelengthwasfixedat200nm．Inthisap—proach，FITCcouldbedeterminedinCIM5一FITCfluoresc

7、entantibodysolution．Thecorrelationcoeficientforlinearregressionequa—tion(r)forFITCstandardsamplewasabove0．99O0．Thedetectionlimitwasabout0．20Ixg-mL～．Thespikedrecoverieswereabout105．49％，andtherelativestandarddeviationwaskeptwithin5．36％．Themethodissimple，sensitive，rap

8、id，reliableandreproduc—ible．ItcanbeappliedforthedeterminationofFITCinCIM5．FITCfluorescentantibodysolution．Keywords：capillaryelectrophoresis(CE)；C