DB34∕T 2784-2016 油菜抗黑胫病评价技术规范.pdf

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1、ICS65.020B30DB34安徽省地方标准DB34/T2784—2016油菜抗黑胫病评价技术规范RulesforresistanceevaluationofOilseedRapetoBlackleg(Leptosphaeriabiglobosa(Desm.)Ces.etDeNot.)文稿版次选择2016-12-30发布2017-01-30实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T2784—2016前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院作物研究所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起

2、草单位：安徽省农业科学院作物研究所。本标准主要起草人：李强生、荣松柏、胡宝成、侯树敏、费维新、陈凤祥、吴新杰、初明光、江莹芬、范志雄、雷伟侠、郝仲萍、盛蕾。IDB34/T2784—2016油菜抗黑胫病评价技术规范1范围本标准规定了油菜抗黑胫病鉴定技术方法和抗性评价标准。本标准适用于普通油菜（包括选育品种/系、地方品种、特殊遗传材料、DH群体）、杂交油菜对油菜黑胫病抗性的田间鉴定和评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改

3、单）适用于本文件。DB34/T2167油菜黑胫病菌鉴定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1抗病性diseaseresistance植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传的性状。3.2致病性pathogenicity病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。3.3人工接种artificialinoculation在适宜条件下，通过人工操作将接种体放于植物体感病部位并使之发病的过程。3.4抗性评价evaluationofresistance根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。3.5分离物

4、isolate从植物发病部位通过人工培养、纯化、再接种和分离等方法获得的病原菌的培养物。1DB34/T2784—20163.6接种体inoculum能够侵染寄主并引起病害的病原体。3.7病情级别diseaseratingscale植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.8严重度severity发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或总体积的百分率，亦可用分级法表示，即将发病的严重程度由轻到重划分出几个级别，分别用一些代表值表示，说明病害发生的严重程度。3.9油菜黑胫病OilseedRapeblackleg由油菜黑胫病菌Leptosph

5、aeriabiglobosa(Desm.)Ces.etDeNot.所引起的油菜病害。4接种体4.1接种菌株的分离、纯化及鉴定接种菌株的分离、纯化及鉴定方法见DB34/T2167。菌株需进行致病力测定，选择代表性菌株，冷藏保存备用。4.2油菜黑胫病菌接种体接种体为菌丝块和子囊孢子，用于品种鉴定的接种菌株必须是自然种群中有代表性的菌株，或者是具有不同毒性谱的多个菌株的混合菌种。4.3油菜黑胫病菌接种体制备4.3.1菌丝块接种体制备无菌条件下，挑取少量在PDA培养基上保存的病菌菌丝体，转移至添加抗生素的PDA培养基（添加100mg/L链霉素和5

6、0mg/L氨苄青霉素）上，20℃培养5d～7d。挑取菌丝体边缘少量菌丝转移至不含抗生素的PDA培养基上，培养3d～6d，再次挑取边缘菌丝接种至PDA培养基，直至纯化。根据接种所需菌丝块的量，将已纯化的病菌转移至PDA培养基上，20℃培养20d～25d。用打孔器将培养皿中的表面布满菌丝的PDA切成直径5mm的小块，接种用。4.3.2子囊孢子接种体制备油菜收获时，收集受黑胫病侵染的油菜秸秆。将染病秸秆放置于室外排水良好的土地上，在自然条件下，让假囊壳中子囊孢子自然发育成熟。2DB34/T2784—2016每周在显微镜下观察一次，当假囊壳中50

7、％子囊孢子成熟时，将秸秆转移至室内自然风干，在低温干燥的条件下保存待用。5抗病性鉴定5.1对照品种选择较稳定的感病品种作为抗性鉴定试验的对照品种。可选择皖油13、Westar或皖油25，或其他本地高感品种作为感病对照品种。5.2鉴定圃选址油菜黑胫病抗性鉴定在田间病害鉴定圃进行鉴定。鉴定圃设置在油菜黑胫病适发区，选择具备良好自然发病环境和可控灌溉条件、地势平坦、土壤肥沃的地块。5.3鉴定圃设置鉴定圃畦宽2m，鉴定材料顺序排列。每份鉴定材料种植3行，行距0.33m,定苗后每行10株。3次重复，每一重复均含有对照品种材料。试验四周设置保护行，土

8、壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同，鉴定圃内不施用杀菌剂。5.4播种播种时间与大田生产一致，或适当调整播期，以使植株接种期和发病期能够与适宜的湿度、温度等气候条件相遇。5.5接种5.5.1菌丝