生物化学教学课件 实验一.docx

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1、实验一粗脂肪的提取和定量测定─索氏提取法一、目的和要求:1.学习和掌握粗脂肪的定量测定法─索氏提取法。2.学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。3.比较不同材料中所含粗脂肪的含量。二、实验原理:脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物,能溶于脂溶性有机溶剂。本实验用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC~60ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外,还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等,

2、故称为“粗脂肪”。三、实验准备1、脱脂棉2、镊子3、分析天平4、电热恒温水浴锅5、恒温烘箱6、索氏脂肪提取器7、索氏脂肪提取仪8、滤纸9、干燥器10无水乙醚四、实验内容及方法1.抽提瓶在105℃±2℃烘箱中烘至恒重,材料干燥至恒重。2.称取干燥后的材料1-2g,放入研钵中研磨(越细越好)将研磨好的材料用脱脂滤纸包住,用少许脱脂棉擦拭研钵壁上粘的材料及油脂,也一并放入滤纸包.用棉线拴住滤纸包,将滤纸包放入抽提管,在抽提瓶中加入2/3体积的无水乙醚在70-75℃的水浴上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为每小时约10次,共回流约50次,或检查抽提

3、管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。3取出试样,仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部吸完,擦净瓶外壁,将抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干至恒重。五、注意事项1.向滤纸筒内填装样品及回流提取过程中都不应外漏,否则重做。2.应用无水乙醚,并在通风柜中进行蒸干,实验室内禁止明火与吸烟。3.提取瓶中加入的乙醚不能少于1/2,也不能多余2/3。六、实验作业W1—W0粗脂肪%=————×100%W式中:W——样品重(g)W0——提取瓶重(g)W1——提取瓶和脂肪重(g)

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