《临床标本检验》PPT课件.ppt

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1、临床标本的细菌学检验基本要求认真核对：了解诊断：联系临床：正确采集和处理标本无菌操作：对无菌或有菌标本不同处理盛放容器：无菌容器采集时间、部位：送检时间、方法：及时送检、低温或保温保存安全防护：及时检验和报告：选择合适的培基养和培养方法增菌血平板SSMAC/EMB巧克力培养基SNANYESA备注血液骨髓++++++可同时做厌氧、需氧培养，做菌计尿液++++做菌计、需要时做厌氧粪/肛拭+++++弧菌培养选用碱性蛋白胨水和TCBS培养基痰/咽拭++++++直接涂片镜检脓液分泌物++++++++直接涂片镜检、可同时做厌氧、需氧培

2、养生殖道标本++++++++++可直接涂片镜检眼耳口鼻标本++++++++直接涂片镜检体液+++++直接涂片镜检，可同时做厌氧、需氧培养血液和骨髓采血时间与次数：采集血培养都应该在使用在使用抗生素之前进行；对间歇性寒战，应该估计寒战或体温高峰时间。采血部位：肘静脉或肘动脉骨髓采集：增菌培养：培养基中加入SPS检测方法和报告普通培养：分别做厌氧和需氧培养阳性表现：均匀浑浊，革兰阴性菌浑浊有绿色，肺炎链球菌表面有菌膜有绿色荧光，铜绿假单胞菌下面沉淀，链球菌溶血，溶血性链球菌浑浊有胶胨，葡萄球菌灰白色菌膜，枯草芽孢杆菌涂片革兰染

3、色镜检，直接药敏、分离培养报告临床阴性结果7天报告检测方法和报告特殊培养脑膜炎奈瑟菌培养：37℃加5-10%CO2伤寒或其它沙门菌：接种葡萄糖胆汁肉汤或胆盐肉汤草绿色链球菌：胰酶酪蛋白大豆肉汤，同时做需要、CO2和厌氧培养L型细菌：高渗液体培养基，“油煎蛋”菌落厌氧培养：真菌培养：临床意义确诊菌血症和败血症金黄色葡萄球菌见疖、痈、脓肿引起的败血症革兰阴性菌见尿路、胆道、胃肠道引起的败血症草绿色链球菌引起亚急性心内膜炎铜绿、金葡引起烧伤后败血症尿液的处理标本采集：一般培养采用清洁中段尿。采样前，用肥皂水或清水清洗外阴，排出尿

4、液前段需丢弃，中段和后段尿液10-20ml盛装于无菌的容器。肾盂尿采集法膀胱穿刺尿采集法结核菌涂片或培养用24小时尿取沉淀。检测方法和报告直接镜检-离心沉淀涂片革兰染色-淋球菌镜检假丝酵母镜检结核分枝杆菌镜检检测方法和报告分离培养-普通培养：-淋球菌培养：-厌氧菌培养：-真菌培养：检测方法和报告菌落计数倾注平皿法：尿液稀释成1：10、1：100、1：1000，取此液1ml放入直径9cm灭菌平皿内，同时加入已熔化并冷至50℃的培养基与尿混合，待凝固后置35℃培养。定量接种环涂抹法：使用1ul的定量接种环沾满尿液，在分离培养基

5、分离培养。生长的菌落数乘以1000，等于每毫升尿中的菌数。报告：革兰阴性菌>105cfu/ml，革兰阳性菌>104cfu/ml有临床意义阴性报告为“48h培养无菌生长”患者徐某，男，26岁，因烧伤入住某院烧伤病房等待植皮手术。期间，患者烧伤创面有蓝绿色有甜腥气味的粘稠分泌物渗出，随后患者出现41℃高热、呼吸急促、血压下降、昏迷。临床诊断为败血症休克，立即给予广谱抗生素抗菌治疗与对症支持治疗，同时采集血标本送检验科微生物室检验并要求做药敏试验。请问，该患者可能为哪种细菌感染？血培养将会出现什么现象？该如何进一步鉴定？患者周某

6、，男，65岁，结肠癌术后化疗三日后出现高热，常规应用抗生素治疗无效，遂临床采集血标本送检验科微生物室，要求血培养鉴定病原菌及药敏试验。微生物室工作人员血标本经18h培养后，出现均匀混浊，酚红指示剂变色。请问该病人可能是什么细菌感染？如何进一步鉴定？患者李某，女，57岁，术后留置导尿3d后出现发热（38℃以上）、尿痛、排尿困难，查体有下腹触痛与肾区叩痛，临床初步判断为肾盂肾炎，病房要求检验科派人协助采集尿液标本送检。请问如何正确采集标本，并如何进行检验？粪便标本自然排便法：挑取脓血、黏液的粪便2-3g于无菌的纸盒中，或放置于

7、增菌液中送检直肠肛拭子法：直接送检或放入运送培养基中送检检测方法直接镜检：针对特殊细菌，如霍乱弧菌、结核、真菌等-霍乱弧菌：鱼群样排列的革兰阴性菌，动力阳性-葡萄球菌：金葡菌引起的假膜性肠炎-结核分枝杆菌：-艰难梭菌：革兰阳性粗大杆菌，无荚膜、有芽孢-空肠弯曲杆菌：细小、弧形、S形或螺旋形革兰阴性检测方法分离培养-沙门菌及志贺菌：增菌培养或直接接种于SS和MAC、CB，37℃18-24h培养，挑取可疑菌落接种KIA/MIU，进一步做生化和血清凝集试验-霍乱弧菌：碱性蛋白胨水37℃增菌6h，挑取菌膜接种TCBS平板，37℃培

8、养16-20h，挑选可疑菌落氧化酶阳性，多价“O”诊断血清凝集试验-大肠杆菌培养：挑取脓血、黏液的粪便接种于MAC或EMB，37℃培养18-24h，挑取可疑菌落接种KIA/MIU，进一步做生化和血清凝集试验-金黄色葡萄球菌培养：接种于高盐甘露醇琼脂，37℃培养18-24小时-副溶血弧菌培养：增菌后接种与