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1、间苯二酚法测定蜂蜜中果糖的研究［摘要］对利用间苯二酚法测定蜂蜜中果糖的条件进行了优化选择，并对其应用性进行了评估.结果表明，来糖与间苯二酚、盐酸共热生成的红色络合物在483nm处吸收峰最鬲；当间苯二酚质量浓度为2g/L.盐酸浓度为5mol/L.加热温度为100°C、加热时间为7min.果糖的质量浓度在0・2—2g/LZ间时，杲糖的质量浓度与吸光值具有良好的线性关系，回归方程为Y=0・035+0.5648x,r2=0.9994.［关键词］蜂蜜；果糖；间苯二酚；测定引言蜂蜜是一种良好的保健食品，它的主要成分是糖类，糖类的组成是衡量蜂蜜质量的重要指标•由于缺乏合
2、适的检测方法，蜂蜜中果糖通常很难测定，口前关于这方面的相关报道也较少.因此，建立蜂蜜中果糖的测定方法对蜂蜜质量控制及检测具有重要的意义.常用的果糖分析方法有旋光法、薄层色谱法］、高效液相色谱法】、气相色谱法及分光光度法等.旋光法虽然快速准确，但取样量大；薄层色谱不适于定量分析，而常只是作为定性分析的手段.高效液相色谱及气相色谱法结果精确可靠，但设备昂贵、需要专门的分析检测人员、分析成本窩，不适于现场检测.分光光度法在测定果糖时有多种运用形式，紫外分光光度法由于在紫外区易受蜂蜜中其它成分（如小肽、硝酸根蔗糖）的干扰而准确性不高.间苯二酚法是一种常用的酮糖和醛
3、糖定性鉴别方法.本文拟建立利用间苯二酚显色反应分析杲糖方法，并対该方法测定蜂蜜中果糖的适用性进行评价，为利用间苯二酚法分析检测蜂蜜中的果糖提供条件参数.1材料与方法1.1材料5种蜂蜜样品购自福州山红星农场.1.2试剂与仪器果糖、间苯二酚、盐酸均为分析纯，CARY50型紫外可见分光光度计（美国瓦里安公司）.1.3原料及标准样品的处理方法原料或标准样品——加入适量间苯二酚及盐酸溶液——定容——水浴加热至100°C并恒温一段时间——迅速冷却一测定吸光值.2结果与讨论2.1实验条件的优化与选择2.1.1吸收曲线波长的确定配制一定质量浓度的果糊，加入适量间苯二酚及4
4、mol/I,的盐酸溶液，煮沸6min,迅速冷却后在450、550mnZ间进行光谱扔描，结杲如图1所示.果糖用间苯二酚在酸热条件下显色后的垠大吸收峰483価处，因此木实验选用此波长作为测量波长.0.M1.21.610却蕈二詮勺黒樽的质II秋度比®1色后的吸收光讹图M2列•二■与虞比例对医童的2.1.2间苯二酚质量浓度対果糖测量的影响尚定果糖质量浓度为lg/ni,盐酸浓度为4mol/L,调节间苯二酚与果糖的质量浓度比分别和2.0,100°C显色6minJn测定吸光度，结果如图2所示.当问苯二酚与果糖质量浓度比低于1.0时，吸光度随比值的增大呈线性增加；当间苯二
5、酚质量浓度大于果糖质量浓度时，再增加间苯二酚的质量浓度，吸光值增大的幅度明显变小，慕本处于一个相对稳定的值.所以，在实际测量时应适当控制间苯二酚的质量浓度稍大于果糖质量浓度.2.1.3盐酸浓度对显色反应的影响固定果糖质量浓度为lg/g，间苯二酚质量浓度为2g/L,调节盐酸浓度分别为1、2、3.4、5、6、7、8、9moL/L,100°C反应6min,测定吸光度,结果如表1所示.由表1可见,盐酸浓度会对显色反应产生重要影响，当盐酸浓度低于8m（）l/L时，吸光值随着盐酸浓度的增加而增加，盐酸浓度超过6mol/L后就开始出现沉淀，显色反应后需过滤才能测定吸光度
6、.因此在实际应用时既要避免盐酸浓度过低致使显色反应不灵墩，乂应避免盐酸浓度过高而出现沉淀，适宜的盐酸浓度应在4一6mol/L之间.表1盐酸汰度对果博显色圧应的影响Tab.IAbsorptionvaluesaftertrefltmentsofdifferentHCI亍曲葩報度/m士LI?3457~T_9吸光度__0B5__0.326~0・4890.5470.5890.5970.607~~0.603溶液透明状态微红透明浅红透明红色透明红色透明幣红透明棕红微浑浊棕红轻度浑浊棕红澤浊褐色浑浊2.1.4显色时间对显色反应变量的影响配制一系列果糖质量浓度为1g/g＞间
7、苯二酚质量浓度为2g/L、盐酸浓度为5mol/L的混合溶液，在100oC下分别显色2、4、6、8、10、12、14、16、18min,测定其吸光值,结果如图3所示•可见,显色时间对显色反应也会产生重要影响，显色时间在6—8min之间，吸光值最大；当显色时间小于6min时，吸光值随显色时间的増加而增大；当显色时间大于8min时，吸光值随显色时间的增丿川而减少.因而在实际操作时，应控制显色时间在6—8min之间.2.2工作曲线的绘制配制一系列的果糖溶液，控制间苯二酚的质量浓度为2g/L,盐酸的浓度为5mol/L,显色温度为100°C,显色时间为7min,测定吸
8、光值与果糖质量浓度Z间的关系，实验结果见图4・当果糖质量浓度在0〜
