高速逆流色谱技术分离纯化天然产物中黄酮类化合物的研究进展.pdf

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1、第39卷分析化学(FENXIHUAXUE)评述与进展第2期2011年2月ChineseJoumalofAnalyticalChemistry269～275高速逆流色谱技术分离纯化天然产物中一黄酮类化合物的研究进展邸多隆郑媛嫒。陈小芬黄新异封士兰(中国科学院兰州化学物理研究所，中科院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室，兰州730000)(兰州大学药学院，兰州730000)(中国科学院研究生院，北京100039)摘要高速逆流色谱(HSCCC)技术是一种连续高效的新型液一液分配色谱技术，在中药、生化、食品、天然产物化学、环境分析等领域有着广泛的应用。本文综述

2、了部分利用高速逆流色谱技术分离纯化已知和未知黄酮类化合物的文献报道，并介绍了几种新近发展的高速逆流色谱以及其在分离纯化黄酮类化合物和其它化合物中的应用。关键词高速逆流色谱法；黄酮类化合物；分离；提纯；综述1高速逆流色谱技术在分离纯化天然产物中黄酮类化合物研究概况黄酮类化合物(Flavonoids)是一类重要的植物化学成分，是传统中医药和植物化学物质中重要的活性物质。黄酮类化合物的基本母核为2一苯基色原酮，包括黄酮、异黄酮、二氢黄酮、花色苷元、黄烷醇和属于黄酮异构体的橙酮，以及由它们所衍生的多种衍生物。黄酮类化合物具有显著的生理药理活性：芦丁、槲皮素、槲皮苷能增强心脏收缩，减

3、少心脏波动数；黄芩苷、木犀草素等有抗菌消炎作用；柚皮素等具有雌激素作用；甘草查耳酮等有抗HIV活性等】。此外，黄酮类化合物还可作为功能食品添加剂、天然抗氧化剂食用。基于上述功效，可以看出从天然产物中分离纯化黄酮类化合物具有重要意义。天然植物中所含有的黄酮类化合物种类众多、成分复杂、含量较低，并具有多种多样的生物活性，因此从天然植物中分离纯化黄酮类化合物极具重要性和挑战性。传统的分离纯化黄酮类化合物的方法有液一液萃取法、柱色谱法(硅胶柱，聚酰胺柱和葡聚糖凝胶柱等)、大孔吸附树脂、制备＼半制备型液相色谱法等，这些方法存在耗时、耗费溶剂、需反复多步操作及难于实现工业化等缺点。高速

4、逆流色谱法(HSCCC)是20世纪80年代初，由美国国立健康研究院(NIH)的Ito和Bowman[在液～液分配色谱的基础上研究和发展起来的一种现代色谱分离制备技术。HSCCC技术因其连续高效，回收率高，制备量大等特点，可直接制备分离粗提取，化合物的分离仅依赖于其不同的溶解性能，不存在因不可逆吸附造成样品损失和因表面化学等因素引起被分析物变性等缺点，在各分离提纯领域中的应用越来越多，尤其是在天然产物活性成分的分离纯化领域，已成为一种备受关注的新型分离纯化技术。近年来，HSCCC技术以其独特的分离优势，已广泛应用l于天然产物中黄酮类化合物的分离纯化研究。Sutherland等

5、综述了198篇利用HSCCC技术分离纯化天然产物有效成分的文献报道：从108种植物中分离得到了363种化合物，其中黄酮类化合物的文献报道有89篇，所分离得到的黄酮类化合物占总数的25％。可见，HSCCC技术在分离纯化黄酮类化合物方面有着极大的应用空间。表l总结了近年来部分HSCCC技术在分离纯化天然产物中黄酮类化合物研究报道。201f0726收稿；201f11—04接受本文系中科院“百人计划”择优支持项目，国家自然科学基金项目(No．20775083)资助Email：didl@licp．cas．en270分析化学第39卷表1部分HSCCC技术分离纯化天然产物中黄酮类成分Ta

6、bleIApplicationofhighspeedcountercurrentchromatography(HSCCC)inseparationandpurificationforflavonoidsinrecentVears第2期邸多隆等：高速逆流色谱技术分离纯化天然产物中黄酮类化合物的研究进展271续表1(ContinuedtoTable1)2不同HSCCC技术应用于分离纯化天然产物有效成分的应用2．1正交轴逆流色谱[2正交轴逆流色谱(Cross—axiscountercurrentchromatography，Cross—axisCCC)与传统的高速逆流色谱的区别在

7、于其螺旋管支撑件的自转轴与仪器公转轴是相互垂直的，在进行行星式运动时形成三维的不对称离心力场，这一特殊结构使其非常有利于亲水性溶剂系统固定相的保留，从而适用于大分子的生物样品的分离制备。正交轴逆流色谱在利用亲水性溶剂系统分离大极性化合物和双水相系统分离水溶性生物大分子等方面的应用具有明显的优势。正交轴逆流色谱已经被成功地用在多种蛋白质、生物酶和多糖等大分子化合物的分离中。Wei等利用正交轴逆流色谱从羊肚菌中分离得到了三种糖蛋白，所用溶剂系统为12．5％(w／w)聚乙二醇8000-25％(w／w)KPO(pH=9)，