体积排阻高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海产贝类中镉的形态.pdf

《体积排阻高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海产贝类中镉的形态.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第4O卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第5期2012年5月ChineseJournalofAnalyticalChemistry681～686DOI：10．3724／SP．J．1096．2012．11000体积排阻高效液相色谱一电感耦合等离子体质谱法测定海产贝类中镉的形态赵艳芳一尚德荣宁劲松翟毓秀(中国水产科学研究院黄海水产研究所，国家水产品质量监督检验中心，农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室，青岛266071)摘要运用体积排阻高效液相色谱一电感耦合等离子体质谱联用技术(SEC-HPLC-ICP-MS)分析了高镉积累扇贝和低镉积累菲律宾蛤仔中镉的存在形

2、态，并结合体外全仿生消化技术，研究了在唾液、胃、肠无机物和有机物(含消化酶)作用下，扇贝和菲律宾蛤仔中镉的主要存在形态。结果发现：扇贝中Cd总量约为菲律宾蛤仔的10倍；在扇贝中检测到3种Cd形态：金属硫蛋白(MT)一Cd、谷胱甘肽(GSH)一Cd和半胱氨酸(Cys)一Cd；在菲律宾蛤仔中检测到2种Cd形态：MT-Cd和GSH-Cd；以峰面积作参考进行比较，扇贝中MT-Cd和GSH—Cd含量分别约为菲律宾蛤仔的5．6和2．0倍。结合体外全仿生模型发现，在扇贝胃全仿生提取液中，检测到1种未知小分子有机镉形态(Cd-X)，在扇贝肠全仿生提取液中检测到4种Cd形态，其中MT-C

3、d是主要形态；而在菲律宾蛤仔胃、肠全仿生提取液中均仅检测到1种未知小分子有机态镉(Cd-X)。本实验证明贝类中的MT-Cd，GSH—Cd，Cys-Cd中络合的Cd在生物体胃肠消化液作用下会发生解离。关键词镉；形态分析；体积排阻高效液相色谱；电感耦合等离子体质谱；体外全仿生消化引言镉(Cd)是一种有毒重金属，被美国毒物管理委员会(ATSDR)列为第六位危害人体健康的有毒物质。Cd在正常环境中含量很低，但水生生物对Cd的富集能力极强，如鱼类可富集10～10倍，贝类可富集10～10倍。因此，Cd已成为影响水产品食用安全的重要因素之一。最近连续几年对我国贝类进行的质量安全普查发

4、现，不同贝类体内Cd含量差异很大，尤其以扇贝中Cd含量最高，超标现象最为严重。而菲律宾蛤仔中Cd含量很低，前者约为后者的10倍，甚至更高。Cd在生物体中以多种形态存在，不同形态Cd具有不同的生物学毒性，因此准确测定贝类中Cd的主要存在形态具有重要意义。色谱与原子光谱、质谱联用是元素形态分析的主要技术手段。如HPLC与电感耦合等离子体质谱(ICP—MS)、电喷雾串联质谱(ESI—Ms／Ms)H]、飞行时间等离子体质谱(ICP—TOF—MS)等联用，分析生物体中cd的形态。体积排阻色谱分离(SEC—HPLC)与ICP—MS联用技术同时具有交联葡聚糖(Seph—adexG50

5、)分子筛凝胶过滤层析的根据分子量分离化合物的优点和ICP—MS灵敏的多元素同时检测优点。又因为其流动相一般采用中性的Tris—HC1／NaC1缓冲液，与生物体本身条件相似，因此可以较准确地反应蛋白质以及其它巯基化合物在生物体内与元素的结合状况。Wei等【l0运用SEC—HPLC—ICP—MS联用分析了长穗偃麦草Agropyronelongatum中的cu，zn和cd的形态；杨红霞等运用SEC—HPLC—ICP—MS联用分析了印度芥菜中镉的形态，证明Cd以植物螯合肽(PC)3一Cd、植物螯合肽(Pc)2-Cd、谷胱甘肽(GSH)一Cd，及半胱胺酸(Cys)一Cd4种形态存

6、在。虽然扇贝中Cd超标现象严重，但是目前尚无因食用扇贝而引发镉中毒的报道。因此，研究在生物体的胃肠消化液作用下贝类中cd的存在形态，对评估贝类中cd的食用安全性具有积极意义。“全仿生消化”法即模拟人体消化环境，加入消化液所含无机物和有机物(包括消化酶)，探讨贝类中Cd在人体消化液作用后的主要存在形态。与动物模型相比，体外全仿生消化技术评价贝类中镉形态变化更可靠、简便、易行。本研究以栉孔扇贝(Chlamysfarreri)和菲律宾蛤仔(Ruditapesphilippinarum)为研究对象，采2011—09-03收稿；2011—10-29接受本文系国家自然科学基金(No

7、30371103)和中国水产科学研究院基本科研业务费专项资金(No．2010-t9-12)资助*E-mail：shangdr@ysfri．ac．cn682分析化学第40卷用sEC_Lc—ICP_Ms联用技术对扇贝和菲律宾蛤仔内Cd的主要存在形态进行分析，并运用体外全仿生消化模型，研究在胃肠全仿生消化液作用下2种贝类中Cd的主要存在形态以及形态之间的转化。2实验部分2．1仪器与试剂ELANDRCⅡ电感耦合等离子体质谱(ICP—MS，Perkin—Elmer公司)，工作参数为：射频功率1150W，等离子体气流速15L／min，辅助气流速1．2