曲霉的培养条件优化与除磷研究.doc

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1、曲霉的培养条件优化与除磷研究以菌株UV7/为主要研究对象，对它溶磷的所需的生长条件进行正交实验,营养物质与生长环境的条件对菌株的影响进行初步研究，然后再利用各单因索实验考察研究菌株UV7・4培养条件，确定最佳的菌株培养条件。6.1培养条件优化6.1.1正交实验设计正交试验表，考察各种培养条件对菌株溶璘的影咆，确认各种因素中对溶磷影响最大的因索。液体培养基：使用PKO培养基.除碳源（蔗糖）和氮源（（NH^SOJ的其他成分含量不变。其他因索如表6・1所示。Table6・1Factorlevelsoforthogonaltest因素水平ApH值B接种量(cfWmL)C碳源g/LD氮源g/L15.01

2、06100.527.0107201.539.0I08302.56.1.2结果与分析利用四因索三水平正交试验考察确认菌株UV7-4的培养条件中各种因索对溶磷影响程度。试验数据釆用极差法来处理。由正交试验的结果数据（表4・2）可知，目标性状实测数值最大的处理为6处浬（本试验的城佳处理），即1OOOmL液态培养基中蔗糖和（NH4）2SO4的加屋分别为由极差分析的原理可知，其最佳组合应为第一因素的第一处理，第二因索的第三处埋，第三因素的第三处理以及第四因索的第三处理，即UV7・4的最适培养条件为:1000是升培养基中蔗猶和（NH4）2SO4的加量分别为30g・2.5®培养基的pH为5・0・接种量为极差

3、值为第三因素最大，第四，第二因索次之，第一因索最小。这说明培养条件对UV7-4脱磷的影响程度从大到小依次为碳源〉氮源〉接种S>pHo因素编号ABCD溶磷量123456789①e.o.om.00.00355777.999678678678ooooooooo100.537.56201.538.56302.549.78202.543.68300.548.36101.535.56302.548.68100.532.80201.54132pH值接种量碳源(讥)氮源(g/L)(mg/100mL)(cfu/mL)KI125.9129.92K2127.6119.72K31122.8126.66kl41.974

4、3.31k242.5339.91k340.9342.22R1.63.4105.92118.72123.56115.44146.82126.6635.3139.5741.1938.4848.9442.2213.633.47注；表中KI、K2、K3分别为3种处理水平的总值，kKk2、k3为平均值；R足极差;6.2溶磷微生物的培养条件研究利用正交试验数据结果，设计对溶磷微生物培养条件单因素试验研究，先考察pH值、摇瓶转速、电子接种量等因素的影响，再考察培养基组分的影响。其屮，在对培养基组分的彩响因索中重点考察了碳湧、氮源浓度等因索对菌株UV7-4脱磷的影响。6.2.1培养条件的影响6.2.1.1初始

5、pH值的影响在微生物生长的过程中，环境的pH值对他们的生理活动有很大的彩响，而培养基的pH值是微生物在一定环境条件下代谢活动的综合指标。液态培养基中的初始pH值是否合适关系到菌株的生长状况和产物分泌的多少，以及菌体自身代谢系统的正常运转。这都会对微生物的溶磷效果产生关联。液体培养基；使用PKO培养基。培养条件：培养液初始pH值5・0、6・0、7・0、8・0、9・0,温度3(TC,转速150r/min・培养时间7天.?<6・3初始pH值的形响试验结果Table4-7InfluenceoftheinitialpH初始pH值5.06.07.08.09.045.1440.2441.4432.2833.

6、31(mg/IOOmL)pH1.631.771.861.852.4190n初姑pH图6-1初始pH值对UV7-4溶瞬的影响Fig.6-1FluenceoftheinitialpHondephosphorizationofUV7-4由表6-3和图6-1可知当培养液初始pH值为5.0〜7.0时，菌株UV7-4的生长情况良好，溶磷量在较高水平且稳定；而当初始pH值高于7.0以后，菌株生长量随着pH值增大而减小且溶磷量明显下降。因为菌株UV7M是一种真菌(曲霉〉，真苗一般偏好较酸性的环境。试验结果表明，初始pH值5.0〜6.0期间，UV7-4的溶磷效果最好。试验同样还发现,在pH值为6.0时，菌株的溶

7、嫌效果最好。说明在这个pH值的环境中，最适于真菌砲子的萌发，菌抹能够很好的生长，当菌株达到一定的生物量之后，UV74才能分泌足够的有机酸使Ca3(PO4>2溶解。6.2.1.2摇瓶转速的影响调节摇瓶转速实际上是通气戢，曲霉UV7Y是好氧菌.它是在有氧的条件下进行生长繁殖的。液体培养基：使用PKO培养基。培养条件:初始pH值6.0左右、温度3(TC,调节摇床转速分别为80r/min.120r/min