二乙酰一肟检测尿素.ppt

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1、Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.尿素又称脲,是体内蛋白质分解代谢的含氮终产物,不与血浆蛋白结合,分子量仅为60,体内生成量受蛋白质摄入量,机体蛋白质分解代谢及肝脏(生成尿素的唯一器官)功能的影响。尿素是表明游泳池水受到人体污染程度的一项重要指标。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5Clien

2、tProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.原理:尿素与二乙酰在酸性环境中加热可缩合成红色的二嗪衍生物,颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定,故通常用二乙酰一肟代替,它与强酸作用,产生二乙酰。后者再与尿素反应,缩合生成红色的二嗪衍生物。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.临床二乙酰一肟法H+二乙酰一肟+

3、水→二乙酰+羟胺H+二乙酰+尿素→二嗪化合物(粉红色)Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.泳池二乙酰一肟法Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.临床二乙酰一肟法测定尿素1原理尿素与二乙酰一肟在酸

4、性条件下,经镉离子(或三价铁离子)的催化产生缩合,并在氨基硫脲存在下,生成了4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物,颜色深浅与尿素含量成正比。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.2试剂2.1酸性试剂:在1L容量瓶中加入蒸馏水约100mL,然后加入浓硫酸44mL及85%磷酸66mL,冷却至室温后加入硫氨脲80mg,硫酸镉2g,溶解后用蒸馏水稀释至1000mL,贮棕

5、色瓶中放冰箱内保存半年不变。2.22%二乙酰一肟溶液:取2g二乙酰肟,溶于蒸馏水中,定容100mL混合均匀,即可使用。尿素使用液:取酸性试剂90mL加2%二乙酰一肟10mL,混合均匀即可。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.3方法3.1定性测定:取使用液2mL加入试管中,加0.1mL牛奶,在电炉上快速加热至煮沸,保持沸腾1min,观察颜色,用不含尿素样品做

6、比较。正常奶颜色为淡红色,添加尿素的牛奶反应颜色为玫红色。3.2定量测定:取5mL使用液加入0.1mL牛奶,于20mL的螺口试管中,加盖拧紧,于95℃水浴中反应20min,过滤后,于525nm处测定吸光值。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.4结果由于正常牛奶中含有少量的尿素,所以正常牛奶的反应试管也是有颜色的,由于尿素含量较少,所以颜色为淡红色。尿素含量

7、异常的牛奶,反应后颜色为玫红色。两者的区别明显,在实际的质量控制中,应以正常奶做比较,来判断原料奶中尿素含量的水平,进而做出判断。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.5小结优点:灵敏度高,操作简单,适用于自动仪器分析。缺点:反应不专一,线性范围窄(<150mmol/L),特异性低,试剂腐蚀性强,加热有异味释放。难以实现自动化。Evaluationonly.

8、CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.常采用卫生部颁发的二乙酰一肟分光光度法(简称原法)。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5Clien

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