X射线诱导人外周血细胞炎症相关基因表达水平.pdf

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheexpressionlevelsofinflammation-relatedgenesthatrespondtoX-rayinhumanperipheralbloodByFeiGuoSupervisor:Prof.ShienLiProf.YurninIⅣDepartmentofOccupationalandEnvironmentalSciencesCollegeofPublicHealthJune2014原创性声明IIIIIIIIIIIIIIIIIlY254

2、5691本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:郭飞日期:z()I午.5,穹学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位沦文的全部或部分编入有关数据库进行检

3、索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:鄹UEt期:2(7I牛.6.c}摘要目的筛选与炎症反应相关的电离辐射响应基因,分析不同剂量X射线照射诱导入外周血炎症相关基因的表达谱差异、剂量一效应关系、时间一效应关系及其在正常人群中的表达水平,探讨电离辐射诱导的炎症反应机制和利用炎症相关基因表达改变建立辐射早期生物剂量计的可行性。方法1.X射线照射后炎症相关基因的表达谱测定:以剂量为0、0.5、3和10Gy的X射线照射1

4、名健康女性的外周血,用定量PCR芯片(quantitativereversetranscription.polymerasechainreaction(qPCR)array)检测照射后24h的炎症相关基因mRNA表达变化。2.炎症相关电离辐射响应基因表达的剂量.效应关系和时间一效应关系:以剂量为0、0.5、1、3、5、8、10和12Gy的x射线照射健康人外周血,用实时荧光定量PCR方法(real—timefluorescentquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,Q—RT-PCR)检测CD40LG、BI

5、RC2、IFNG、TNFSF4、CCL2和CCL7在照射后6、12和24hmRNA表达变化。3.炎症相关电离辐射响应基因在正常人群外周血中的mRNA表达水平:应用Q—RT-PCR方法检测TNFSF4、CCL2和CCL73个基因在正常人群中的mRNA相对表达水平。结果1.X射线照射后炎症相关基因的表达谱测定:QPCR芯片技术检测到各剂量组差异表达基因共62个。0.5Gy照射后有9个基因表达上调,19个基因表达下调;3Gy照射后有8个基因表达上调,19个基因表达下调;10Gy照射后有16个基因表达上调,32个基因表达下调。31个基因只在特定剂量照射后表达发生变化,10个基因在所有

6、检测剂量照射后均发生显著变化。2.炎症相关电离辐射响应基因表达的剂量一效应关系和时间一效应关系:CD40LG、BIRC2、IFNG、CCL2和CCL75个基因mRNA相对表达变化与照射剂量和照射后培养时间不相关(尸>0.05)。不同剂量x射线照射诱导TNFSF4基因mRNA相对表达变化呈现剂量.效应关系(F=5.765,P=O.013)且照射后摘要6h和12h的剂量.效应关系较照射后24h好;TNFSF4基因mRNA相对表达变化与照射后培养时间不相关(尸>0.05),但随着培养时间的增加有表达上调的趋势。3.炎症相关电离辐射响应基因在正常人群外周血中的表达水平:正常人群中TN

7、FSF4、CCL2和CCL7基因mRNA相对表达水平与年龄和性别不相关。结论1.不同剂量X射线照射人外周血后可致62个炎症相关基因mRNA相对表达水平发生显著变化。其中,27个基因是这项研究新发现。2.不同剂量X射线照射诱导TNFSF4基因mRNA相对表达水平呈现剂量一效应关系,TNFSF4有可能成为潜在的辐射生物剂量计候选基因。关键词x射线人外周血炎症相关基因生物剂量汁AbstractObjectiveWescreenedinflammation—relatedgenesthatrespondtoio

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