【精品】番茄组织培养体系的建立和优化.doc

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1、番茄组织培养体系的建立摘要本体系的建立主要以二个番茄品种为主要的实验材料，探讨了影响帝茄纠织培养的两方面因索：实验结果表明：1.不同种类的激索配比对番茄子叶、下胚轴愈伤纟I［织和不定芽的诱导效果不同。2.激素IAA在番茄生根中起重要的作用。关键词:番茄培养体系激素浓度配比植株再生ABSTRACTSomeprincipalfactorsaffectingtomatocultureinvitrowerestudiedsystematicallyontwovarietiesoftomatointhispaper・theresuItsindicatedt

2、hat:1.theinductioneffectsofthecallusandthebudsinductionwerequitecomplexaccordingtodiffercnlhormonecategories,concentmtionsandtheircombinations.2・hormoneplayedimportdntroleintomatorootindueti（）nandsoundseed!ing.Keywords:tomato;culturesystem;hormoneconcentrationcombination;plan

3、tregenertion中文摘耍英文摘要目录■-VZ«刖S1材料与方法2实验结果与分析1.1不同浓度的6-BA和IAA组配互作效应1.2IM的不同浓度对生根的影响3讨论2.1关于建立转基因番茄组织培养体系的问题2.2建立番茄组织培养体系的必要性参考文献致谢帝茄是茄科帝茄屈的一•年生或多年生的植物，它是壯界上最重要的蔬菜作物之一，同吋它又是一重要的模式作物，因此，它无论在生产上还是科学研究上都具有相当重要的价值。利用基因工程技术，在番茄育种和殆利

4、特性改良方面的研究已经取得了很大进展，己经获得了抗病毒、抗虫、抗除草剂、抗冻、延长贮存、改善风味、改变

5、果色和育性的转基因番茄，而口成为第一个商品化的转基因植物。植物基因工程的发展为帝茄育种开辟了新的途径，目前进行帝茄基因转化较为成熟的方法，主要采用农杆菌介导的遗传转化法，是以农杆菌为媒介，将农杆菌媒体上特定区域内的目的基因导入细胞，并整合到染色体上（1）。它具有宿主范围广、操作简便的，能保证导入的外源基因的完報性的特点。鉴于ft前农杆菌转化番茄的方法一趋于成熟和稳定，组织培养体系的优劣将成为能否高频率转化和高频率再生获得转基因植株的关键。因此研究影响番茄离体培养的诸多因索并建立一个高效植株再生体系，仍然是番茄基因工程育种中的一个急需解决的重要问题

6、。帝茄在植物组织和细胞培养屮也已成为广泛硏究的模式植物。帝茄的纽织培养技术对番茄砧种改良具有很大的应用潜力（2）,故有关番茄的离体培养的研究一克进行（3）。对于番茄的组织和细胞培养，前人做了很大研究并获得成功（4）o番茄的纽织培养最早开始于1944年,smith釆用番茄胚培养,获得了栽培番茄X秘鲁番茄杂交种。Norton和boll1954年首次报道番茄芽再生是以根培养诱导的愈伤纽.织上取得的。此后科学家作了多方面的研究，使得番茄纟I［织培养技术得到了迅速的发展，分别成功的用根、叶、花药和种胚等进行离体培养并获得再生植株（5）o但在番茄组织研究中，

7、因激素种类及配纟I［差别较大，结果亦不尽一致（6）o鉴于种种原因，在番茄遗传转化研究中，常用子叶、下胚轴离体培养的高频再生成为获得转基因番茄的重要技术于段。总之，组织培养技术在番茄品种改良上具有广泛的应用前景，要想获得遗传转化的成功，建立一个良好的纽织培养体系是关键-•环。本实验是在前人的基础上，以二个不同品种的番茄栽培品利-红宝石6号和红宝石604为主耍实验材料，对帝茄的愈伤组织及不定芽的诱导和再生植株的生根壮苗进行实验，主要研究不同种类的激索配比对愈伤组织和不定芽的诱导规律，以及生根壮苗，建立完善的番茄纟I［织培养体系，为番茄的转基因提供良好

8、的受体系统。1材料与方法1.1供试材料番茄品种，红宝石6号和红宝石604,山郑州大学实验室提供。1.2试验方法1.2.1无菌苗的获得用无菌水浸泡种子过夜，大约15个小时，用70%的酒精消毒30—60秒，无菌水冲洗1次，然后分别用10%,5%的次氯酸钠消毒各10分钟，用无菌水冲洗4—5次，每次约3分钟。然后接种在1/2MS的无激素固体培养基上，培养。1.2.2无菌苗外植体的接种将子叶剪去两端后，中间部分一分为二，约0。5X0。5大小，，叶片下表面向下接种在附加激索的MS培养基上的中央；剪収0。6—0。8CM的下胚轴放在培养基的边缘。（数量视不同情况

9、而定）1.2.3培养基种子培养无菌苗培养基：以1/2MS（即大量元素减半，微量元素及其它不变）为培养基，不加任何英它激素。外植体愈伤组织