GRP78在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义.pdf

《GRP78在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterExpressionofGlucose·-RegulatedProtein78inHepatocellularCarcinomaandItsclinicalSignificanceByXuexiaCaoSupervisor：Prof．WeidongZangHumanAnatomyandHistologicEmbryologyBasicMedicalSchoolFebruary,2013原创

2、性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：糍日期：必侈年厂月砂厂，曰”l口～学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州

3、大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：日期：弘侈年r月咖日摘要GRP78在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义硕士研究生：曹雪霞导师：臧卫东教授郑州大学基础医学院人体解剖学教研室河南郑州450001背景与目的肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界第二大致死性癌症，其在全世界范围内的发

4、病率也一直呈上升趋势，全球每年约有75万新发肝癌患者见于报道。由于起病隐匿，早期症状不明显，而且进展迅速，在我国大多数患者确诊时已达晚期，失去手术治疗机会，治疗困难，预后很差。化疗作为肝癌综合治疗手段之一，疗效欠佳，耐药是其主要原因。从不同角度探讨肝癌耐药机制的研究成为国内外学者研究的热点，但仍未取得突破性进展。近年来，内质网应激(endoplasmicreticulumstress，ERs)与细胞生存之间的关系逐渐被认识，内质网(endoplasmicreticulum，ER)的功能对大多数细胞的活动和生存是必需的。ERs途径

5、是独立于死亡受体途径和线粒体途径的第3条凋亡信号途径。GRP78／BiP(glucose-regulatedprotein78，GRP78：theimmunoglobulinheavychain-bindingprotein，BiP)表达上调常被视为ERs的标志。大量研究表明：发生ERs的细胞能调节促凋亡分子如CHOP、caspase．12等和促进细胞存活分子GRP78等的表达、活化，最终决定细胞是生存还是凋亡。GRP78作为一种分子伴侣在蛋白质的折叠和转运过程及内质网应激反应中发挥重要作用，其在多种肿瘤组织中呈高表达。ERs在

6、肝癌发展过程中是否被启动及GRP78在肝癌组织中的表达情况甚少述及。本文拟检测GRP78在原发性肝细胞癌组织中的表达，探讨人类原发性肝细胞癌发生发展过程中是否启动内质网应激，推测其可能的临床意义。摘要方法采用免疫组织化学(immunohistochemistry)、Real—timePC．R和WesternBlot检测53例肝细胞癌组织(17例高分化型癌，23例中分化型癌，13例低分化型癌，均经术后病理证实。)及19例正常肝组织中葡萄糖调节蛋白78的mRNA及其蛋白的表达。结果1．免疫组织化学结果显示正常肝组织及肝癌组织内GRP

7、78蛋白的表达情况GRP78蛋白阳性染色主要定位于细胞质内，弥漫点状大小不一的棕黄色细颗粒状，核仁不着色。肝癌组织中的表达水平均显著高于正常组织；在肝癌组织中GRP78表达水平与细胞分化程度相关。分化程度越低，表达越高。2．Real．timePCR结果显示正常肝组织及肝癌组织内GRP78mRNA的表达情况GRP78及13-actin的扩增动力学曲线为典型的S形，平台期汇于一条直线上，指数区明显；熔解曲线呈单峰型，表明引物的特异性良好。通过内参13-actin校正之后，比较各组GRP78mRNA的相对表达，结果显示，肝癌组织组GR

8、P78mRNA的相对含量显著高于正常肝组织组，且与肝癌组织分化程度成反比。(P<0．05)3．Westernblot结果显示正常肝组织及肝癌组织内GRP78的表达情况正常肝组织的GRP78蛋白条带较弱，而肝细胞癌组织的GRP78蛋白条带较强。与正常肝组织相比，肝