冷冻切片操作方法探讨.pdf

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1、·1144·临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2013Oct;29(10)冷冻切片操作方法探讨张同海，黄文斌关键词:冷冻切片;标本;温度中图分类号:Ｒ329-33文献标志码:B文章编号:1001－7399(2013)10－1144－02在病理科工作中，快速冷冻切片是病理工作中一项重要且有难度的工作。病理医师需在较短的时间内发出病理报告，对切片的要求较高，不容许有差错。本文就针对冷冻切片的制作方法在实际应用中的体验做一些探讨。1材料与方法①②1．1材料全部实验材料均由本院临床科室提供，共100图1采用正确的方法制备冷冻切片:组织结构清晰，细胞形态完整例，

2、其中包括各系统组织，如乳腺、甲状腺、胃、脑、淋巴结组图2与图1同一组织，方法操作不当制备的切片:组织间出现裂织等。使用LEICACM1900冷冻切片机切片。隙，组织结构模糊1．2方法所用标本共分为以下几类:(1)含有较多脂肪组织的标本。(2)不含或者只含少许脂肪组织，组织结构较科虽有《临床技术操作规范》为指导，但各家医院执行力度疏松的标本，如甲状腺、脑、卵巢、淋巴结等。(3)含纤维组不一，仍有依据操作者经验进行操作的现象发生。织较多，组织结构较致密的标本，如子宫、乳腺等。将上述标取材标本最好是新鲜的标本。但是，有时因其他原因，本根据要求取材，组织直径约1.5cm，厚

3、0.2～0.3cm，立即［1］如为了保存组织内的抗原，组织事先必须用固定液固定。放入冷冻切片机。第一类标本冷冻时温度尽量调低，直至切对于已固定标本，在冷冻前可用流水冲洗固定液，然后再用出满意的切片为止。第二类标本，冷冻温度调至－21～－19吸水纸尽量吸干净。如标本用乙醇固定，尽量用流水洗净，℃时切片。第三类标本温度调至－24～－21℃时切片。组［2］因为乙醇会抑制组织冷冻，使组织冷冻效果不佳。织切片后经乙醚乙醇固定0．5min后，行HE染色3～4min，所取组织块厚度合适，不能超过0.3cm，因为组织越切片即可完成。［2］厚，冷冻所需时间越长，而且易形成冰晶体。尤其

4、是对含水分较多的脑组织，切取组织应更薄些，使其速冻，避免冰晶2结果的形成。组织块的直径不能太大，否则切片容易卷曲。组织对于不同样的组织标本，取材的大小、方法、组织冷冻的块也不宜太薄，以免影响冷冻组织随后的常规制片。温度、时间、切片时采用的方法不同，可造成切片质量完全不［3］切取的切片可用乙醚乙醇固定，因为乙醚乙醇可使组一样，采用正确的方法制作的切片，镜下观察组织形态结构织内的蛋白质快速沉淀，可防止组织掉片和细胞变形。固定完整、细胞染色清晰、细胞形态与常规切片差异不大(图1)，后，即可入苏木精中染色，但在苏木精中染色时不可像快速完全满足诊断需要。若操作不当，可引起细胞

5、肿胀、收缩、组石蜡切片那样用酒精灯加热，防止组织变形。经苏木精染2织间裂隙、结构不清等人为假象(图2)。～3min即可，因为组织是新鲜未固定标本，着色较快、较深，因此冷冻快速切片染苏木精时间要比石蜡切片短一些，以防3讨论染色过深。病理快速制片技术可分为石蜡加快和冷冻快速。冷冻脂肪组织的冷冻切片是个难题，脂肪组织切片时需注意切片因其方便快捷的优势，越来越被广泛使用。若操作不如下操作:(1)脂肪组织冷冻时温度须极低时才能切片，但当，也会给诊断带来风险。作者认为只要操作过程中各方法对在同一冷冻头上的非脂肪组织，低温又造成切片不满意，正确，注意其中的关键步骤，能够避免不良问

6、题。目前，病理所以在切片时尽量去除组织上的多余脂肪组织，如取淋巴结时尽量去除淋巴结周边的组织。(2)对于含有脂肪的组织，收稿日期:2013－04－02要尽可能避免脂肪早接触刀片，因为切片时可能会使连着脂作者单位:南京医科大学附属南京市第一医院病理科，南京210006肪的包埋剂被切掉，影响非脂肪组织的切片，而且脂肪组织作者简介:张同海，男，主管技师。Tel:(025)52887053，E-mail:tong-会污染切片机台面。(3)防卷板及刀片必须清洁，如果有脂haizhang@aliyun．com肪组织污染必须及时用纱布清除，如果发现组织上出现条纹临床与实验病理学杂

7、志JClinExpPathol2013Oct;29(10)·1145·冷冻组织包埋剂在浆膜腔积液细胞块制作中应用1211111程新宇，吴璠，孙虓，金丹，白阳，王星，王翠芳关键词:冷冻组织包埋剂;浆膜腔积液;细胞块2012～2013年各临床科室送检的浆膜腔积液。中图分类号:Ｒ361+．3文献标志码:B1．1．2仪器中佳SC-3612低速离心机，Leica-Asp300s全文章编号:1001－7399(2013)10－1145－03自动脱水机，Leica-HM315Ｒ石蜡切片机，Leica-G-1140H(C)石蜡包埋机，微型震荡仪，VENTANA-BenchMar