提高冷冻切片制片质量的方法探讨

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1、第19卷第4期中国组织化学与细胞化学杂志Vol_19．No．42010年O8月CHINESEJOURNALOFHISTOCHEMISTRYANDCYT0CHEMISTRYAugust．2010提高冷冻切片制片质量的方法探讨田玉旺李琳朱红艳邢宜苗金红(北京军区总医院病理科，北京100700)(关键词]冷冻切片；质量；探讨[中图分类号]R361．2[文献标识码]A术中冷冻切片诊断是病理科的急诊工作，其重慢，依赖于温度、组织的大小及厚薄，取材大小一要性和责任性都很大。其中冷冻切片质量的好坏至般为1．5×1．5×0．3cm为宜。取材时，尽量避开关重要

2、，它是许多病理技术人员一直探讨的问题。组织坏死出血区，要尽量剔除脂肪、毛发、骨及钙本文对影响制片质量的各种因素及环节进行了分析，化物；取材时注意干燥，取材工具尽量不要接触并提出了可行的防范措施，使制片质量明显提高。水，囊性组织内有很多液体，取材时不要用水冲洗；若组织标本表面附着大量粘液或血液需用纸巾材料和方法擦拭干净，不能用水冲洗。取材用的刀剪应当锋1．标本选取我院手术中的各种活体组织标本。利，取材时避免刀来回挫动挤压组织。2．仪器德国徕佧一1900型冷冻切片机。另外，术中组织送检要及时，以保证标本新3．方法冷冻切片方法和染色方法基本同常鲜。

3、冷冻切片标本不要浸入酒精、生理盐水和甲醛规，切片厚5／,m。液内；需要术中进行快速病理诊断的活检组织，最好用一次性塑料或乳胶手套盛放，切忌用干纱布、结果和讨论卫生纸或干棉花包裹组织，以免纱布等上面的线毛粘在组织上，不利于制片，且易损伤刀刃。在整个制片过程中注意文中所述细节后，制片质量明显提高，组织结构清晰，核浆染色鲜艳，组3．冷冻条件的设置织内冰晶明显减少。冷冻切片是借助在低温的条件下，使组织迅速影响冷冻制片质量的因素较多，我们经大量实冻结达到一定硬度进行切片的一种方法。一般工作验及实际应用，认为在整个制片过程中应注意以下时间内，箱体的温度设

4、在一20℃左右，非工作时间设在一l5℃左右较好。由于各种组织的结构不同，细节。1．做好前期准备工作适宜的切片条件也有所不同。控制好冷冻组织的温1．1日常工作中，仪器要定期进行擦拭、除度和冷冻时间是制作优质切片的关键。霜、清洁消毒等，使冷冻切片机始终处于良好的运3．1肝脏、脾、脑、肾脏、甲状腺组织、淋巴行状态。结等细胞较丰富，纤维组织较少的标本，冷冻室温1．2切片刀要定期进行更换，调整好切片刀的度一般控制在一16℃～一18℃左右，冷冻时间应当缩角度，刀头刀架不要松动，不同的组织可使用不同短，否则组织变脆、易碎，镜下形成裂隙，破坏了刀片，一般组织

5、选用R一35型，较硬的组织，如宫组织结构，影响诊断。冷冻时间控制在lmin左颈组织、子宫肌瘤等，使用A一35型较好。防卷板右，且适当切薄。调整到最佳位置，防卷板要注意清洁，避免切片污3．2对于质韧、硬的宫颈组织、子宫肌瘤等纤染和切片出现皱褶。在切片过程中，尽量不要随意维多的组织，冷冻室温度一般为一l9℃～一22℃之调整切片刀的角度和防卷板的位置，以免延长制片间，冷冻时间也不宜过长，控制在2min左右较好，过长会使组织变硬，不仅损刀而且组织片会出时问。1．3试剂及染液要定期进行更换，以保证染色现裂痕、厚薄不均或呈帘状，染色时易脱片。切片质量。时

6、，速度可相对慢一些。2．取材方面3．3含脂肪的乳腺组织，冷冻室的温度一般控标本取材大小要合适，因为组织冷冻速度的快制在一25℃～一3o℃左右；脂肪瘤等多脂肪的组织冷冻室的温度在一35℃以下，冷冻时间要适当延长，一般5min左右。脂肪含量多的组织标本，由于脂[收稿日期]2009—1220[修回日期]2010—03—10肪组织冰点低，只有低于一40℃才能冻硬，单压缩[作者简介]田玉旺，男(1962年)，汉族，主任技师。机的冷冻切片机达不到其冷冻温度，因此不易制第4期田玉旺等．提高冷冻切片制片质量的方法探讨409片。双压缩机的冷冻切片机机头温度可在

7、2—3min对于活检小组织冷冻时间相对短一些，以肉眼内降到一5O℃，把冷冻托夹在机头的样本夹上，待观察周围全发白时及时修整，避免组织过脆，切片脂肪组织冻硬后即可切出完整切片。另一种方法时速度可相对慢且要匀速切片，过快会出现跳刀现是：将脂肪组织放人液氮速冻后，利于切片。切片象。时进刀要快，否则切片粘连。特殊组织如淋巴结，观察组织上部有一小点未3．4卵巢、肺、胆囊、胃壁、肠壁、胰腺等软完全冻凝时快速进行切片。组织，冷冻室的温度控制在一2O℃～一22℃左右，冷质地较硬的组织，如子宫肌瘤、宫颈组织等，冻时间2min。以肉眼待冷冻组织中央反光区尚存光泽

8、时为最佳切3．5睾丸、膀胱组织，冷冻室温度一18℃～一片时机。由于宫颈组织结构较致密，对冷冻的时问20℃，冷冻时间2min左右。及温度较敏感，组织易冷冻过度，组织切