生物化学实验答案第1版.doc

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1、1.简述桔皮中提取果胶的原理？果胶主要以不溶于水的源果胶形式存于植物中。当用酸从植物中提取果胶时，原果胶被酸水解形成可溶性果胶。而水解后的果胶不溶于乙醇，在提取液中加入乙醇时，可使果胶沉淀下来而与其他杂质分离。2.简述722S型分光光度计的使用方法？1预热仪器。2选定波长。3固定灵敏度档。4调节“0”点。5调节T=100%.6测定。7关机。3.用比色法测定物质含量时，为什么要做空白对照管？用空白管调整零位时，仪器和试剂等造成的系统误差就可以抵消或减小到最低程度。4.等电点的定义？蛋白质或两性电解质(如氨基酸)所带净电荷为零时溶液的pH，此时蛋白

2、质或两性电解质在电场中的迁移率为零。符号为pI。5.一句我们所做的实验，说明蛋白质在什么情况下沉淀，什么情况下变性，沉淀和变性有无联系？使蛋白质沉淀的方法有盐析法，有机溶剂沉淀法，等电点沉淀法，蛋白质会在高温，过酸过碱情况下变性。蛋白变性不一定就沉淀。只是空间结构的改变，基本的一级结构没有被破坏，一定条件下可以复性。只不过绝大多数条件都相当苛刻。蛋白沉淀不一定变性。盐析就是例子。虽然脱去水化层，肽链未转变为伸展状，二级以上结构为变化。6.简述电泳的原理？原理是电泳材料比如DNARNA蛋白质带电荷在电场中可以迁移影响因素有材料中杂质电压电泳时间等

3、杂质可导致跑出来的条带无法分辨电压不稳过高过低电泳时间过长过短都会使跑出来的胶达不到理想效果7.简述纸层析法分离氨基酸的原理？纸层析法用滤纸作为惰性支持物，以水作为固定相，以有机物作为流动相，样品点在滤纸上进行展层，氨基酸在两相中不断分配，因为分配系数不同，故样品随流动的速率不同，从而被分开，形成距原点距离不等的层析点。8.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳的原理?血清中给中PRO在电场中想着与其电性相反的电极移动，由于各种PRO的PI值不同，在同一PH中，所带电荷量不同且各分子大小形状有差异所以在同意电场中泳动的速度不同。9.MOHUM法活力单位

4、定义是什么？每毫升血清在PH=7.4,37°C条件下与底物作用30MIN,没生成2.5微克丙酮酸为1单位。10.在蛋白质显色试验中的黄色反应中，出现在深浅不一的黄色说明了什么问题？这与蛋白质的浓度有关，颜色深浅与浓度成正比。11.电泳时，醋酸纤维薄膜点样的一端应靠近哪个电极？为什么？电泳时点样位置应位于负极。因为泳动方向是从负极向正极的。12.血清醋酸纤维膜电泳可将人血清蛋白一次分为哪几条区带？血清清蛋白、a1球蛋白、a2球蛋白，β球蛋白、γ球蛋白13.何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？主要是纸上层析法的用词。源自流速（rateofflo

5、w）。溶剂从原点渗透到距离a（一般在20—30厘米时测定）的时候，如果位于原点的物质从原点向前移动到b，那么b/a的值（0.0—1.0）就是这种物质的Rf值。和被测物质极性、展开剂极性有关，也和固相吸附剂的吸附能力、洗脱剂有洗脱能力有关。14.为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？铅和汞是重金属，会使蛋白质变性，而人体组织中蛋白质是必不可少的组成成分，比如胃、食道等组织。误服铅或汞后，吞入大量鸡蛋清（鸡蛋清中含有大量蛋白质），可使铅与汞先与蛋清反应，减少与机体组织的接触，进而减轻毒性。15.在等电点时，蛋白质的溶解度为什么最低？在等电点时，

6、蛋白质的净电荷为零，分子间斥力最小，此时蛋白质容易聚集，故溶解度最低。16.使用离心机时应注意什么？一.离心机在预冷状态时，离心机盖必须关闭，离心结束后取出转头要倒置于实验台上，擦干腔内余水，离心机盖处于打开状态。　　二.转头在预冷时转头盖可摆放在离心机的平台上，或摆放在实验台上，千万不可不拧紧浮放在转头上，因为一旦误启动，转头盖就会飞出，造成事故！　　三.转头盖在拧紧后一定要用手指触摸转头与转盖之间有无缝隙，如有缝隙要拧开重新拧紧，直至确认无缝隙方可启动离心机。四.在离心过程中，操作人员不得离开离心机室，一旦发生异常情况操作人员不能关电源(P

7、OWER），要按STOP。在预冷前要填写好离心机使用记录。五.不得使用伪劣的离心管，不得使用老化、变形、有裂纹的离心管。17.依据我们所做的实验，说明酶的最适温度，最适PH值，抑制剂，活化剂？待定。。。