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时间:2020-03-22
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1、血液细胞形态学检查北京协和医院血液科葛昌文工作步骤1.登记(1)收到标本后,登记患者姓名、性别、年龄、病历号,并告知病人取报告的时间和日期;(2)标本要登记化验号及分类号、标本采取日期穿刺部位、标本来源(如:病房、门诊、外院)。2.染色(1)在玻片血膜头部标明姓名或编号,并将其平置于染色架上;(2)加瑞氏染液6-8滴覆盖全部血膜,随后加缓冲液(PH6.4)10-12滴,用洗耳球吹匀;(3)血片染色10-15min,骨髓片染15-20min(根据有核细胞的多少而定),必要时用低倍镜观察染色效果;(4)手摇玻片数次,使染液渣上浮,用自来水先缓后急
2、冲去染液,晾干待检。3.镜检外周血涂片检查法1.复习申请单的临床诊断、送检目的和要求。2.肉眼观察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好坏。3.低倍镜检查(1)涂片的厚薄及染色情况。(2)估计白细胞数(可大体核对WBC直接计数是否正确)。(3)了解白细胞大致分布及片尾部有无异常细胞、特大细胞及细胞团。(4)选择具有代表性的镜检区域(多介于涂片体尾之间,细胞分布均匀,互不重叠、挤压)。4.油镜检查(1)进行WBC分类计数:一般计数100个有核细胞(若WBC≤1.0×109/L,WBC分类计数不足100个,则注明有核细胞少见,全片分类多少个WBC;特殊情
3、况如骨髓移植后,则注明有核细胞少,无法分类),观察细胞形态、比例及有无巨大或异常细胞。(2)白细胞分类计数:计数中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞比例,注意各类细胞形态有无异常。(3)注意片尾部有无不成熟细胞或异常细胞(如中晚幼粒、有核红细胞、淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等)。(4)红细胞形态(群体、个体)及排列(重叠、缗钱状)(5)血小板数量、形态及聚集性。(6)寄生虫。5.外周血涂片报告单内容:(1)WBC数及主要成分、各类白细胞比例及形态是否正常。(2)有无不成熟白细胞、有核红细胞及异常细胞情况。
4、(3)成熟红细胞大小、形态、色素状态(中心淡染、核残余物、多嗜性RBC)及排列等情况。(4)血小板数量、形态及聚集性。(5)寄生虫。骨髓细胞形态检查法1.复习患者病历资料、实验室检查结果及治疗情况2.肉眼观察涂片在染色前均需用肉眼观察;以确定标本的取材、涂片是否“合格”,血膜厚薄,有无脂肪珠及“骨髓小粒”。3.低倍镜检查(1)取材、涂片、染色的好坏。(2)有核细胞多少(判定增生程度)及其分布;粒与红系的比例及各阶段比例的初步印象。(3)寻找异常细胞如转移癌细胞等。(4)选择油镜检查区域:要求能代表此涂片细胞的基本情况,有核细胞多
5、,分布均匀,形态舒展、清晰易辨认。4.油镜检查观察细胞形态及进行有核细胞分类计数。一般油镜观察区域在涂片血膜的体尾交界部位,分类计数时标本上下移动,验证低倍镜检查所得的初步印象。通常计数200个有核细胞,特殊情况可计数400或500个有核细胞,增生低下或有核细胞甚少时,可分类计数100个有核细胞。在油镜观察中,通过血细胞工作站对有代表性的细胞区域采集图象并入库保存(见血细胞工作站操作程序)。具体内容如下:(1)骨髓有核细胞分类计数,以百分率(%)表示,计算各系所占百分比和粒红比例(M/E)。(2)粒系:计算粒系所占%及各阶段比例;观察核移向
6、(左移、右移)及形态的改变(巨幼变、双核、P-H畸形、胞浆颗粒多少或有无)。(3)红系:计算红系所占%及各阶段比例;观察形态有无异常(巨幼变、类巨幼变及双核、多核、核分裂等残余物)、多嗜性红细胞多少、成熟红细胞形态及排列等。(4)淋巴细胞及单核细胞比例及形态有无异常(5)巨核系:外周血血小板数量正常时(100-300×109/L),一般不做巨核细胞计数;当PLT>500×109/L时,应计数全片的巨核细胞数量,但无需分类;当PLT<100×109/L,要计数全片巨核细胞,分类50个巨核细胞(或换算成%),并注明有无血小板生成。注意病理性
7、巨核细胞(巨大异常巨核、亚小型、小型、微型巨核),计数100个有核细胞中的病理性小型、微型及亚小型巨核细胞的数量。注意血小板量与质(形态、大小、聚集性等)的改变。(6)非造血细胞的种类和数量:此类多在涂片尾部或边缘处,分类计数结果可能比实际低。(7)异常细胞:如转移瘤细胞、高雪氏细胞、N-P细胞、恶组细胞等。5.骨髓涂片检查报告单内容:(1)取材涂片及染色情况。(2)骨髓增生程度及主要成分,一般用M/E表示。(3)粒系:增生情况及所占%,各阶段比例,核移向(左移、右移)形态发育与异常改变,嗜酸性及嗜碱性细胞情况。(4)红系:增生情况及所
8、占%,各阶段比例,形态有无异常(如巨变、类巨幼变、分裂相、核残余物、双核、多核等)及成熟红细胞形态。(5)淋巴及单核细胞:数量和形态是否有异常。(6)巨核系:数
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