一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf

一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf

ID:51439122

大小:163.78 KB

页数:3页

时间:2020-03-24

一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf_第1页
一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf_第2页
一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf_第3页
资源描述:

《一株植物乳杆菌培养条件优化.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库

1、第3期总第189期农业科技与装备No.3TotalNo.189至Q!Q生曼旦垒g堕!坚!坐丝墨!i宝望!!壁!!兰垒望Q!旦£笾璺翌曼里9坚i巳里竺翌!丛璺!:兰Q!Q一株植物乳杆菌培养条件优化柴虹宇,王玉田★,张莉力(辽宁医学院食品科学与工程学院,辽宁锦州121001)摘要:采用单因素试验的方法,优化突变株L.plantarumP1881的培养条件。优化后的培养条件为:培养时间48h;发酵液初始pH值6.5;接种量(V/V)4%;培养温度30℃,此时苯乳酸产量为0.624s/L。关键词:植物乳杆菌;培养条件;苯乳酸中图分类号:R155.5文献标识码:A文章编号:1674-116

2、1(2010)03-0028-03苯乳酸为一种新型生物防腐剂,能抑制多种食源性致病菌、腐败菌,且具有宽广的pH范围、热稳定性等优点,已引起了人们的关注,但受发酵水平低、产量不高等因素的制约.难以进行工业化生产⋯。辽宁医学院食品科学与工程学院实验室于2008年分离获得一株产苯乳酸的乳酸菌,并鉴定为植物乳杆菌。后经过诱变育种,得到一株高产突变株L.plan.tarumPl881。菌株的发酵水平不仅与其遗传性能和生理特性有关,还与其培养条件有关。因此,有必要对遗传性能稳定的高产苯乳酸突变株L.plantarumPl881的培养条件进行优化改良,以期提高其产量,从而为工业化生产苯乳酸提供

3、可行依据。1材料与方法1.1材料与仪器1.1.1试验菌株L.plantarumPl881由微生物实验室保藏。1.1.2培养基种子培养基组成为:葡萄糖10g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨10g/L,番茄汁300m饥,pH6.2-6.4。发酵培养基组成为:葡萄糖25以,酵母浸粉35班,磷酸氢二钾22叽,MgS041s/L,MnS040.3g/L,吐温一803mL/L,pH6.2—6.4。收稿日期:2010一Ol一20基金项目:辽宁省教育厅资助项目(2008431)作者简介:柴虹宇(198仁),女,硕士.从事食品微生物方面的研究。通信作者:王玉田(195卜).男。教授。研究生导师,从事

4、畜产品质量与安全工程技术方面的研究。1.1.3主要试剂苯乳酸购自ALFA公司:其他材料为市售,甲醇为色谱纯,试剂为分析纯。1.1.4主要仪器与设备日立高效液相色谱系统:配有日立L一7420紫外检测器和Kromasil—C18反向色谱柱(250mmx4.6into,5斗m)。1.2试验方法1.2.1苯乳酸含量的测定1)发酵液处理:将经过筛选获得的菌株接种子液体发酵培养基,30℃培养48h;取10mL发酵液,加20mL乙醇,5000r/mln离心15min;取上清液,95℃水浴保温40min,用10mL乙醚萃取2次,合并萃取液,50℃挥干,用甲醇溶解并定容至10mL,冰箱冷藏备用。2

5、)苯乳酸的测定【2](HPLC法):流动相为甲醇和水的混合液;梯度洗脱程序为0~15min由70%甲醇线性变化至100%,15—20rain保持100%甲醇,20~22min由100%甲醇线性变化至70%:检测波长为210rim;流速为lmL/min;柱温为30℃;进样量为10斗L。1.2.2pH值的测定采用PHS一3C精密pH计测定pH值。1.2.3茵体生长量的测定菌体生长量的测定采用比色法r3]:发酵液用无菌水稀释至lO倍体积,以培养基为空白对照,测定OD锄处的吸光度。1.2.4残糖的测定残糖的测定采用菲林滴定法【引。1.2.5菌种活化从冰箱中取出L.plantarumPl8

6、81斜面菌种,室温静置40min,然后取两环菌种接种于装有10mL种子培养基试管中,30℃静止培养24h,备用。2010年第3期柴虹宇等:一株植物乳杆菌培养条件优化292结果与分析2.1培养时间在基础发酵培养基及其他条件不变的情况下。对菌种分别培养12、24、36、48、60、72h,测定生物量和苯乳酸产量(见图I)。趔o0.550.50O.450.400.350.300.250.20l强24h36h船h印h?2h-a-OD值+-PLA产量图1培养时间对苯乳酸产量的影响Figure1TheeffectofclIlturetimeOnPLAfermentafion由图1可知:在培养

7、的1248h内。苯乳酸产量随时间的延长呈上升趋势;培养48h时,苯乳酸产量达到最大;此后尽管发酵时间延长,但其产量并没有明显增加。因此确定苯乳酸的培养时间为48h。2.2初始pH值培养基的初始pH值不仅对微生物有直接影响,还对其产生很多间接影响。它影响培养基中营养物质的离子化程度.从而影响微生物对营养物质的吸收和代谢反应中各种酶的活性。在基础发酵培养基及其他条件不变的情况下,将发酵培养基的初始pH调整为5.0、5.5、6.0、6.5、7.0,于30℃静止培养48h,然后测定生物量

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。