共培养体系中小鼠淋巴细胞RNA编辑酶的表达.doc

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1、共培养体系中小鼠淋巴细胞RNA编辑酶的表达作者:孔亚林,窦科峰,张洪涛,冯全新,张福琴,赵青川【关键词】共培cnExpressionofRNAeditaseofmouselymphocytesinacoculturesystem[Abstract]AIM:TostudytheexpressionofRNAeditaseofmouselymphocytesundertheeffectofheterogeneousantigeninacoculturesystemofmousespleencellsandhumanlivercancerce

2、llsandtoobservetherelationbetweenRNAeditaseandthefunctionalstatusoflymphocytesbytheuseofFK506.METHODS:Spleencellsof1,2,4,6,8,10,12,16,20and24hinthecoculturesystemwereobservedandtheexpressionofRNAeditasewasdetectedbysemiquantitativePCRandwascontrastedwiththemousespleencel

3、lsinasingleculturesystem・ThemousemodelwiththeimmunesystemrestrainedbyFK506wasmade,itsspleencelIswerecoculturedwithstimulatedcellsandthentheeffectofFK506onRNAexpressionofeditasewasdetectedbysemiquantitativePCR・RESULTS:①Thelymphocytesurvivalratewithin24hineachgroupreached7

4、0%・②TheexpressionofRNAeditaseinthecoculturegrouptendedtoshowapatternofdeclining,ascendinganddecliningagain,whiIethatinthecontrolgrouptendedtodeclineconstantlyuntil12handthenremainedatacomparativelylowlevel・③FK506hadanobvioussuppressiveeffectontheexpressionofRNAeditaseand

5、thiseffectdeclinedasthecoculturetimewenton.CONCLUSION:TheexpressionofRNAeditasebecomesactivewhenstimulatedbyheterogeneousantigenandtheexpressionlevelisrelatedwiththefunctionalstatusofspleencells・[Keywords]spleencells;coculture;RNAeditase;PCR;FK506;immunosuppressiveagents

6、【摘要】目的:通过小鼠脾细胞与人肝细胞肝癌细胞共培养,了解在并种抗原刺激下小鼠淋巴细胞RNA编辑酶表达的变化;并且通过免疫抑制药FK506的应用,观察RNA编辑酶与淋巴细胞功能状态的联系.方法:观察共培养1,2,4,6,8,10,12,16,20及24h的小鼠脾细胞,用半定量PCR的方法检测RNA编辑酶表达的变化,并以相同时段单独培养的小鼠脾细胞RNA编辑酶的表达情况进行对照;制备免疫功能受FK506抑制的小鼠模型,取其脾细胞与刺激细胞进行相同时段的共培养,用半定量PCR的方法检测FK506对脾细胞RNA编辑酶的影响.结果:①各组淋巴细

7、胞的活细胞率24h内都能达到70%;②共培养组RNA编辑酶的表达呈降低后升高、再降低的趋势,对照组呈一直降低、至12h后维持在较低的水平;③FK506对RN/编辑酶的表达呈现明显的抑制,与共培养组和对照组相比,这种抑制随着共培养时间的延长而减弱.结论:脾细胞RNA编辑酶在异种抗原的刺激下表达活跃,其表达的高低与脾细胞的功能状态有关.【关键词】脾细胞;共培养;RNA编辑酶;PCR;FK506;免疫抑制剂0引言RNA编辑是近年来发现的转录后修饰过程[1],它通过RN/编辑酶(adenosinedeaminaseactingonRNA,A

8、DAR)对前RNA特异位点修饰,使腺瞟吟核昔转为次黄卩票吟核(Adenosinetoinosine,Atol).除了传统的蛋白翻译途径外,RNA编辑可产生蛋白的同功异构体,接受编辑后的RNA翻译产物可能会与

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