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1、分子生物学实验常用培养基的配制作者:來源：点击次数：3516发布时间：200503201、Ampic订lin（lOOmg/ml）□组份浓度100mg/mlAmpiciIlin□配制量50mL□配置方法1.称量5gAmpicillin置于50inL离心管中。2.加入40讥灭菌水，充分混合溶解后，定容至SOinLo3.用0.22um滤膜过滤除菌。4.小份分装（lmL/份）后,-20°C保存。2、IPTG（24mg/mL）□组份浓度24mg/mLIPTG□配制量50inL□配置方法1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。2.加入401】丄灭菌水，充分混合溶解
2、后，运容至50mLo3.用0.22um滤膜过滤除菌。4.小份分装（1讥/份）后，-20°C保存。3、X-Gal（20mg/mL）□组份浓度20mg/mLX-Gal□配制量50mL□配置方法1.称取lgX-Gal置于50mL离心管中。2.加入40mLDMF（二甲皋甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50讥。1.小份分装（ImL/份）后，-20°C保存。4、LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)YeastExtract,1%(W/V)NaCl□配制量IL□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯屮Tryptone10gYeastExtr
3、act5gNaCllOg2.加入约BOOmL的去离子水，充分搅拌溶解©3.滴加5NNaOH(约0.2mL),调节pH值至7.0。4.高温高压灭菌后，4°C保存。5.LB/Amp培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract1%(W/V)NaCl0.lmg/mLAmpiciIlin□配制量IL□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯屮Tryptone10gYeastExtract5gNaCllOg2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加5NNaOH(约0.2mL),调节pH值至7・0。4.加去离子水将培养
4、基定容至lLo5.高温高压灭菌后，冷却至室温。6.加入ImLAmpicillin(lOOmg/mL)后均匀混合。7.4°C保存。6、TB培养基□组份浓度1.2%(W/V)Tryptone2.4%(W/V)YeastExtract0.4%(V/V)Glycerol17mMKH2PO472mMK2HPO4□配制量IL□配置方法1.配制磷酸盐缓冲液(0.17MKH2PO4,0.72MK2HP04)lOOmLo2.称取下列试剂，置于山烧杯屮。Tryptone12gYeastExtract24gGlycerol4inL3.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。4.
5、加去离子水将培养基泄容至1L后,高温高丿玉灭菌。5.待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液。6.4C保存。7.TB/Apm培养基□组份浓度1.2%(W/V)Tryptone2.4%(W/V)YeastExtract0.4%(V/V)Glycerol17mMKH2PO472mMK2HPO40.lmg/mLAmpicillin□配制量IL□配置方法1.配制磷酸盐缓冲液(0.17MKH2PO4,0.72MK2HP04)lOOmLc溶解2・31gKH2P04和2.54gK2HP04于90mL的去离子水中,搅拌溶解后，加去离子水定容至lOOm
6、L,高温高压灭菌。2.称取下列试剂,置于1L烧杯中。Tryptone12gYeastExtract24gGlycerol4mL3.加入约SOOmL的去离子水，充分搅拌溶解。4.加去离子水将培养基定容至1L后,高温高床灭菌。5.待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液和ln】LAmpicillin(100mg/mL)06.均匀混合后4°C保存。8、SOB培养基□组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKC1lOmMMgC12□配制量IL□配置方法1.配制250
7、mMKC1溶液。在90mL的去离子水中溶解1.86gKC1后,定容至lOOmLo2.配制2MMgC12溶液。在90mL的去离子水中溶解19gMgC12后,定容至lOOmL,高温高压灭菌。3.称取下列试剂，置于1L烧杯中。Tryptone20gYeastExtract5gNaCl0.5g1.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。5量取10讥250mMKC1溶液,加入到烧杯中。2.滴加5NNaOH溶液(约0.2mL),调节pH值至7.0。3.加入去离子水将培养基左容至lLo&高温高斥灭菌后，4°C保存。9.使用前加入5mL灭菌的2MMgC12溶液。9、SOC
8、培养基□组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5
