实验室常用培养基的配制方法

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1、实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100mg/ml)组份浓度100mg/mlAmpicillin配制量50ml配制方法1.称量5gAmpicillin置于50ml离心管中。2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。3.用0.22µm过滤膜过滤除菌。4.小份分装(1ml/份)后，-20℃保存。IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24mg/ml)组份浓度24mg/mLIPTG配制量50mL配制方法1.称1.2gIPTG置于50ml离心管中。2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。

2、3.用022µm过滤膜过滤除菌。4小份分装(1ml，份)后，-20℃保存。X-Gal(20mg/ml)组份浓度20mg/mlX-Gal配制量50ml配制方法1.称量lgX-Gal置于50ml离心管中。2.加入40mlDMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50ml。3.小份分装(1ml/份)后，-20℃避光保存。LB培养基组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨)，0.5%(W/V)YeastExtract(酵母提取物)，1%(W/V)NaCl配制量1L配制方法1.称取下列试剂，置于lL烧杯中。Tryptone10gYeas

3、tExtract5gNaCl10g2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加5NNaOH(约0.2m1)，调节pH值至7.0。4.加去离子水将培养基定容至1L。5高温高压灭菌后，4℃保存。1.2%(W/V)Tryptone2.4%(W/V)YeastExtract0.4%(V/V)Glycerol17mMKH2PO472mMK2HPOaTB培养基组份浓度配制量1L配制方法1.配制磷酸盐缓；中液(0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4)100ml。溶解2.31gKH2PO4和l2.54gK2HPO4于90ml的去离子水中

4、，搅拌溶解后，加去离子水定容至100ml，高温高压灭菌。2.称取下列试剂，置于lL烧杯中。Tryptone12gYeastExtract24gGlycerol4m3.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。4.加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。5.待溶液冷却至60℃以下时，；加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。6.4℃保存。SOB培养基组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKCl10mMMgCl2配制量1L配制方法1.配制250mMKCl溶液。

5、在90ml的去离子水中溶解l.86gKCl后，定容至100ml。2.配制2MMgCl2溶液。在90ml去离子水中溶解19gMgCl2后，定容至100ml，高温高压灭菌。3.称取下列试剂，置于lL烧杯中。Tryptone20gYeastExtract5gNaCl0.5g4.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。5.量取10m1250mMKCl溶液，加入到烧杯中。6.滴加5NNaOH溶液(约0.2m1)，调节pH值至7.0。7.加入去离子水将培养基定容至lL。8.高温高压灭菌后，4℃保存。9.使用前加入5ml灭菌的2MMgCl2溶液。SO

6、C培养基组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)YeastExtract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKCl10mMMgCl220mMGlucose配制量100mL配制方法1.配制lMGlucose溶液。将18gGlucose溶于90ml去离子水中，充分溶解后定容至100ml。用0.22µm滤膜过滤除菌。2.向l00mlSOB培养基中加入除菌的1MGlucose溶液2ml，均匀混合。3.4℃保存。RM培养基组份浓度1%(W/V)YeastExtract0.2%(W/V)KH2PO42%(W/V)Glucose配制量

7、100mL配制方法1.配制50%Glucose溶液。将200gGlucose溶于300ml去离子水中，充分溶解后定容至400ml。用0.22µm滤膜过滤除菌。2.向96mlRM培养基中加入除菌的50%Glucose溶液4ml，均匀混合。3.4℃保存。抗生素的贮存溶液及其工作浓度抗生素贮存液*1工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素羧苄青霉素氯霉素卡那霉素链霉素四环素*250mg/ml(溶于水)-20℃50mg/mL(溶于水)-20℃34mg/mL(溶于乙醇)-20℃10mg/mL(溶于水)-20℃10mg/mL(溶于水)-20

8、℃5mg/mL(溶于乙醇)-20℃20µg/ml60µg/ml20µg/ml60µg/ml25µg/mll70µg/mL10µg/ml50µg/ml10µg/ml50µg/ml10µg/ml5