β-乳球蛋白与表没食子儿茶素没食子酸酯制备纳米粒及其抗肿瘤活性研究.pdf

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1、DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniversityforMaster’sDegreeofEngineeringPREPARATIONOFANDANTI．CANCERACTIVITYEVALUATl0NOFTHENANOPAI之TICLESOF13-LACTOGLOBULIN-EPIGALLOCATECHINGALLATEAuthor：胁nkaiDuMajor：FoodScienceandEngineeringSupervisor：Prof．QizhenDu批妒z角矢乎ZHEJlANGONGSHANGUNlVERSlTYDec．2

2、012CollegeofFoodScienceandBiotechnologyEngineering，ZhejiangGongshangUniversityHangzhou，310035，P．R．China浙江工商大学硕士学位论文p-乳球蛋白与表没食子儿茶素没食子酸酯制备纳米粒及其抗肿瘤活性研究摘要表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为绿茶叶含量最多且起主要生理功能的茶多酚，其具有抗氧化、抗诱变、抗菌，抗病毒、减肥等活性，对癌症、心血管疾病、糖尿病、炎症等也具有很好的治疗作用。然而EGCG性质很不稳定，具有较低的生物利用率，这些缺陷严重限制了该物质在食品、医药等领域的应用。纳

3、米技术作为一种行之有效的方法可以保护芯材免于遭受环境的破坏，其作为高效的药物载体，具有位点特异性，不易产生多重抗药性等特点，其在疾病防治中具有重要的作用。B．乳球蛋白是由反刍动物乳腺上皮细胞分泌的重要的水溶性乳清蛋白，可以作为一种优良的纳米载体与白藜芦醇、姜黄素、CO．3多不饱和脂肪酸相结合以提高其稳定性和生物利用率。本文以B—LG为纳米载体，与EGCG制备了[3-LG-EGCG纳米粒，研究其对EGCG抗氧化活性的保护作用及抗肿瘤活性的增效作用。研究发现溶液不同pH(2．5—7．0)，[3-LG的不同加热温度(30—85。C)，13-LG／EGCG不同摩尔比例(1：2—1：32

4、)以及蛋白浓度(1—10mg／mL)对13-LG．EGCG纳米粒的粒径、Zeta电位、包埋率及载药量具有显著影响。当pH值为6．4—7．0，热激温度为70一85。C，[3-LG与EGCG可浙江工商大学硕士学位论文以形成稳定，澄清及高载药量的纳米分散体。运用红外光谱技术分析发现13-LC_r-EGCG纳米粒与p．LG具有相似的二级结构，热诱导没有破坏蛋白的二级结构。利用透射电镜观察[3-LG--EGCG纳米粒及[3-LG呈白色球状结构。中性条件，[3-LG／EGCG摩尔比例为l：2，热激温度85。C，13-LG对EGCG的缓释效果及EGCG的抗氧化活性保护作用较好。通过体内及体外

5、实验评价不同条件制备的p．LG-EGCG纳米粒(LENPI，LENP2，LENP3，LENP4，LENP5，LENP6，LENP7)的抗肿瘤活性。相对于等剂量的自由EGCG，ELNP3和ELNP6能够显著增加小鼠肝癌细胞株H22细胞及荷瘤小鼠的肿瘤抑制率。此外，ELNP6能够显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数及脾指数。本研究结果表明，13-LG可作为纳米载体保护EGCG与其它多酚类物质的活性，及其在食品，饮料，医药等领域的应用具有重要意义。关键词：EGCG；3-乳球蛋白；纳米粒；稳定性；抗肿瘤II浙江工商大学硕士学位论文PREPARATl0NOFANDANTI．CANCERACTIVI

6、TYEVALUATl0N0FTHENANOPARTICLESOF[5-LACTOGLOBULIN—EPIGALLOCATECHINGALLATEABSTRACT(一)-Epigallocatechingallate(EGCG)，asthemostabundantcatechinandmajorbiologicallyactivecomponentingreentea，hasbeenshowntopossesspotentialactivitiesinantioxidant，antimutagenic，antiobesity，antibacterial，antiviral，and

7、protectiveeffectsfrommanydiseases，suchascancer，cardiovasculardisease，diabetes，andinflammation．However，theinstabilityandlowbioavailabilityofEGCGlimititscommercialapplicationsinfoodandmedicine．NanotechnologyisaneffectivemethodtOprotectthecorematerial