MS培养基母液的配制与保存.doc

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1、MS培养基母液的配制与保存一、目的要求1、通过MS培养基母液的配制，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。2、掌握培养基各种母液的保存方法。二、仪器与用具1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱等。2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签等。3、试剂：95%酒精，NaOH,0.1-1NHCI,配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馆水。三、方法步骤（一）母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。优点：（1）保证各物质成分的准确性。（2）便于配置时快速移取。（3）便于低温保藏。1、MS大量元素母液（10X）称10升量溶解在1升蒸憎水中。配1升

2、培养基取母液100ml。化学药品1升量10升量①NH4NO31650mg/L16.5g②KNO31900mg/L19.Og③CaCI2-2H2O440mg/L4.4g④MgSO4-7H2O370mg/L3.7g⑤KH2PO4170mg/L1.7g2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸帑水中。配1升培养基取母液10ml。化学药品1升量10升量①MnSO4-4H2O(MnSO4・H2O)22.3mg/L(21.4mg/L)223mg②ZnSO4-7H2O8.6mg/L86mg③CoCI2-6H2O0.025mg/L0.25mg④CuSO4-5H2O0.025m

3、g/L0.25mg⑤Na2MoO4-2H2O0.25mg/L2.5mg⑥KI0.83mg/L8.3mg⑦H3BO36.2mg/L62mg注意：COCI2-6H20和CuSO4-5H2O可按10倍量(0.25mgX10=2.5mg)或100倍量(25mg)称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml,(即含0.25mg的量)，加入到母液中。3、MS铁盐母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸僻水中。配1升培养基取母液10mlo化学药品1升量10升量Na2・EDTA37・3mg/L373mgFeSO4・7H2O27.8mg/L278mg注意配制时，应将两种成分分别溶解在

4、少量蒸僻水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合吋，先取一种置容量瓶(烧杯)中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。4、MS有机物母液(100X)称10升量溶解在100ml蒸僻水中。配1升培养基取母液10mlo化学药品1升量10升量①烟酸0.5mg/L5mg②盐酸毗哆素(VB6)0.5mg/L5mg③盐酸硫胺索(VB1)④肌醇100mg/L1g⑤甘氨酸2mg/L20mg5、生长调节剂单独配制，浓度为1-5mg/ml（书屮为0.5-1mg/ml）,一般配成4mg/ml。配制培养基母液时注意事项：%1一些离子易发生沉淀，可先用少

5、量蒸镭水溶解，在按配方顺序依次混合；%1配制母液时必须用蒸憾水或重蒸憾水；%1药品应用化学纯或分析纯；%1溶解生长索时，可用少量0.5-1N的NmOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.5-1N的HCI加热溶解。（二）母液的保存1、装瓶：将配制好的母液分别装入试剂瓶屮，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩倍数、日期。注意将易分解、氧化的溶液，放入棕色瓶中保存。2、贮藏：4°C冰箱。