植物组织培养设备及其使用.ppt

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1、第七节园林植物的组织培养育苗概述1繁殖速度快2繁殖脱毒苗3不受季节限制组织培养繁殖的基本原理细胞全能性植物体中每个完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和产生新的完整植株的能力。体细胞（植株的一部分）完整植株组培条件组培室的建立准备室接种室培养室植物组织培养设备1.灭菌设备：高压蒸气灭菌锅用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。工作原理：在密闭的蒸锅内，0．1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。使用方法：首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热器，然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌

2、锅上的螺丝，关闭放气阀通电。待压力上升到0．05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。三次放气后，关阀再通电，压力表上升达0．1-0．15Mpa时，维持20min后，断电，待压力降至零时，打开入入气阀，取出灭菌材料。注意事项：①对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间；②对于一些布制品，如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好，高压灭菌20-30min；③高

3、压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单位。因此，调PH值时，可适当调高0.－0.3个单位。2.接种设备：无菌超净工作台用于培养材料的消毒及接种。使用前，将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启，灭菌15min后，关闭杀菌按钮，打开照明按钮，即可在上面进行操作。电炉推车灭菌器接种器具酒精灯培养瓶封口膜3.培养设备①带日光灯的培养架，主要用于接种后材料的培养。②恒温箱：又称培养箱，可用于原生质体和酶制剂的保温，也可用于组织培养材料的保存及暗培养。③摇床与转床：在液体培养基中，可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细

4、胞。但注意要设定适合的温度及转速。4.驯化设备①温室②防虫网室5、其它辅助设备①培养基灌装机及洗瓶机③除湿机：使培养室的湿度保持在定的范围内。②空调机：用于接种室和培养室温度的控制。④烘箱：用于干燥洗净后的玻璃器皿，还可用80℃的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。⑤冰箱：用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏，细胞组织和试验材料的冷冻保藏，以及某些材料的预处理。⑥纯水机与蒸馏水发生器：是实验室必备的仪器。⑦天平和显微镜：天平包括分析天平，电子天平，药物天平等，用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质，天平

5、的精确度要到0.0001g，这就要求精确度更高的分析天平。显微镜包括解剖镜，生物显微镜，倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。⑧酸度计：用于校正培养基和酶制剂的PH。培养基成分基本组成无机元素1大量元素：NPKCaMgS2微量元素:FeBZnCuMoCl有机成分维生素肌醇氨基酸糖蔗糖葡萄糖果糖琼脂（0.5~0.8%）琼脂粉琼脂条植物生长调节剂细胞分裂素类KT6-BAZT生长素类IAAIBANAA2,4-D赤霉素类GA3天然添加物椰子汁酵母提取液土豆汁麦芽提取物等水蒸馏水纯净水自来水pH值（5.6~5.8）1mol/LHCl或NaOH其

6、它吸附剂（活性炭）抗氧化剂（Vc柠檬酸等）培养基种类MS培养基Miler培养基Nitsch培养基H培养基White培养基N6培养基培养条件温度：25℃左右光照：3000lx~10000lx时间：12~16h操作技术组培苗工厂化生产的经营与管理一、经营思想经营思想是从事经营活动、解决经营问题的指导思想，它是随着生产力发展而发展的。在经营思想指导下形成经营管理理论，经营管理理论用于指导生产经营实践，不断促进生产力发展。二、市场营销（一）、经营策略（二）、市场预测（三）、产品的营销1．市场需求的预测2．市场占有率的预测生产规模与生产计划1、试管苗增

7、殖率的估算增殖率：是指植物快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。估算试管苗的繁殖量，是以苗、芽或未生根嫩茎为单位，一般以苗或瓶为计算单位。年生产量（Y）决定于每瓶苗数（m）、每周期增殖倍数（X）和年增殖周期数（n），其公式为：Y=mXn2、生产计划的制定制定的要点：1）对各种植物的增殖率应做出切合实际的估算；2）要有植物组织培养信不过各的技术储备；3）熟悉各种组培苗的定植时间和生长环节；4）要掌握组培苗可能产生的后期效应。全年生产量=全年出瓶苗数×炼苗成活率根据植物组织培养的技术路线，拟定工艺流程：如：茎尖→表面消毒→接种诱导培养基→茎尖生长→病毒检测

8、鉴定→培养无根小植株→培养生根→完整小植株→炼苗20-25天→移栽成活。3、工厂化生产的工艺流程成本核算与效益分析一、成本核算的方法二、效益分析1．成本核算2．产销