浅析山楂叶中多糖活性成分的分离提取.doc

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1、浅析山楂叶中多糖活性成分的分离提取文章标题:浅析山楂叶中多糖活性成分的分离提取摘要:多糖是生物体内重耍的大分子物质,是所有有生命的有机体中必不可少的成分,具有特殊活性。通过对山楂叶屮的多糖活性成分进行提取分离,并对其功能特性进行研究。关键词:多糖;山楂叶;提取;分离作者简介:黄飞(1975-),应用化学工程师,南宁新技术创业者中心主任•员,从事生物工程及制药行业管理工作;梁智群,广西大学博士生导师。糖是Q—碳原子上带有耗基的多耗基醛或多拜基酮,或能水解成这类化合物的物质。一般可分为四类:单糖、二糖、寡聚糖(一般含3个以上的单糖)和多糖(含10个以上的单糖)。其中,多糖是存在

2、于自然界的醛糖或酮糖通过糖昔键连接在一起的聚合物。按来源可分为细菌、真菌、藻类及动植物多糖;按化学组分可分为蛋白多糖、脂多糖及多糖缀合体;按生理功能分可分为储存多糖和结构多糖;而按存在场所又可分为细胞壁多糖、基质多糖和胞外多糖;此外,按组成多糖的单糖类型分还可分为同聚糖和杂聚糖。多糖是天然的生物大分子物质,也是重要的生物大分子物质,它儿乎存在于所有的有机体中,是有机体的能量主要来源,是一切有生命的有机体必不可少的组成成分,具有抗肿瘤、免疫、治疗心血管疾病、抗补体、降血压、降血脂等活性。70年代以来,随着人们对多糖认识的不断加深,多糖的作用越发显得突出,大量的药理和临床研究表

3、明,多糖类化合物是一种免疫调节剂,它能激活免疫细胞,提高机体的免疫功能,而对止常细胞没有毒副作用,10多年来已逐渐发展为一种免疫疗法。到冃前为止,已有300多种多糖类化合物从天然产物屮被分离提取出来,其屮从植物屮提取的水溶性多糖最为重耍,这一方面的研究日愈成为一大研究热点。植物类多糖化合物由于它们的独特功能和很低的毒性,在临床应用中显示出越来越广阔的前景[1-3],主要体现在以下几个方面:(1)抗肿瘤药:多糖免疫调节剂可与一些抗癌药合用,恢复由化疗引起的免疫功能低下,增强抗肿瘤的作用[4]。(2)治疗艾滋病(AIDS)等抗病毒药:目前现有的抗艾滋病药物毒性均较大,存在着严重

4、的毒副作用,而硫酸化多糖以其能抑制逆转录酚活性、抑制靶细胞与病毒结合及增强机体免疫功能,没有大的毒副作用而很有希望成为高效低度的抗艾滋病药物。(3)抗衰老药:由于多糖类化合物可以增强老年人的免疫功能,因此很有希望将它们作为抗衰老药应用于临床[5]o大果山楂(CrataeguspinnatifidaBge.var.majorN.E.Br)为蔷薇科植物山里红或山楂的干燥果实,为广西特产,主要产于靖西县。山楂常作为消食药,味酸、甘,性微温,有消食健胃行气散瘀、具有明显的降血脂和改善心脏筹功能。用于肉食积滞,胃胶胀满,泻痢腹痛,淤血经闭,产后淤阻,心腹刺痛,疝气疼痛,高血脂症和改善

5、心脏功能。其叶子的功用目前仅限于做茶饮料,其它功用还未有发现。本篇文章中,我们主耍对山楂叶中多糖活性成分的提取、分离纯化进行研究,现将相关的过程、结果作一叙述。1材料与方法1.1材料1・1・1仪器真空抽提仪器一套,电子继电器,贝克曼温度计,水银温度计,上海产电热恒温水浴锅,SHB-TTT型循环水式真空泵,上海RE-52旋转蒸发仪,美国BECKMENJ2-21型冷冻超速离心机,国产LXJ-II型离心沉淀机,组织捣碎机,索氏抽提器(又称为脂肪抽提器),重庆CS101型电热鼓风干燥机,1000ml容量瓶,摇床,离心机,分液漏斗,756MC紫外分光计,磁力搅拌器,美国LABC0NC

6、0冻干机,美国REVCDSCIENTIFIC.INC超低温冰箱。1.1.2化学试剂所有化学试剂均为分析纯或色谱纯试剂。1.1.3标准液及其配比0.lg蔥酮与50ml浓硫酸混合成的蔥酮一硫酸液,0.lg/1葡萄糖液。1.1・4其它材料范围为3000-7000分子量的透析袋、透析袋夹。1.2实验方法一般,粗品多糖的提取可由以下流程图来表示:预处理一溶剂提取一初步纯化(去除杂质一初步提纯)一粗品多糖1.2.1预处理首先,用组织捣碎机将山楂叶原料粉碎,将其放入纸杯中,之后,用索氏抽提器、甲醇或95乙醇回流将原料中的脂质抽提出来,抽提过程大约为3〜6个小时。抽提结束后,将纸杯中已脱脂

7、的原料晾干或烘干。1.2.2溶剂提取具体操作如下:将晾干或烘干后的山楂叶原料样放入真空抽提器中,通过由电子继电器、贝克曼温度计、水银温度计、恒温水浴锅组成的控温抽提装置于60°C〜80°CZ间进行水提取,每回6h,共三次。然后取上清液,去掉残渣备用。再将上清液通过减压浓缩至三到四倍,此时,可用三倍量的无水乙醇加入浓缩后的上清液中,放置8~10小时至沉淀完全,之后,将上清[1][2]液去掉,此时所得的沉淀再进一步干燥即为粗品山楂叶多糖。1.2.3去除朵质我们这里所说的杂质,是指粗品中除了多糖之外的物质,如蛋白质、色素

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