硝酸还原酶活性的测定ppt课件.ppt

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1、硝酸还原酶活性的测定前方图文并茂请注意！1一、实验原理与过程实验原理1232实验流程标准曲线制作试剂12345亚硝酸钠标准液ml0.20.40.60.81蒸馏水ml0.80.60.40.201%对氨基苯磺酸ml4.04.04.04.04.00.2%ɑ-萘胺ml4.04.04.04.04.0亚硝酸纳含量μg123453酶反应和酶活性的测定取油菜叶洗干擦干用打孔机打孔分成三份/1g分别放入50ml三角瓶加入试剂用针管进行抽气30℃暗室保温30min终止反应分别取1ml上清加入对2ml氨基苯磺酸和2mlɑ-萘胺室温显色20min540nm波长下测

2、定OD值结果分析45二、实验现象与结果现象：用打孔器处理叶片后得到大小均一的叶片，叶片暗反应后看到1号对照瓶内叶片边缘发黄，而2和3号瓶内相对较绿;测吸光值时可以看到实验组比标准曲线组颜色浅的多。6此图为标准曲线显色反应7实验数据：540nm下的OD值:用2、3号管溶液OD平均值减去1号管溶液的OD值，得到的值在标准曲线上查出相应的NaNO2含量（μg）。8结果与计算9把在标准曲线上查得的NaNO2含量代入下式，计算硝酸还原酶活性：将上述结果带入公式测得硝酸还原酶活性为2.60856。10三、查阅文献与结果分析11实验数据存在较大误差，其原

3、因总结如下：1.可能培养方式为水培，氮吸收与土培可能不同，一般来说，氮吸收量越多，说明酶活力越强。2.材料不新鲜，导致酶活力降低。3.实验操作不当所致。4.抽真空时间不够，反应不充分。5.抽真空后没马上进行暗反应。6.OD值读数误差。12四、试验操作技能1.在加液研磨实验材料时分次的添加冲洗研钵和研磨棒。2.经离心后的样品上清须转移至试管中再进行吸取。3.在测定样品OD值时所采用的对照试剂不同，标准曲线与Y轴的交点也不同。4.称量纸折叠至四边上翘，以防药品腐蚀天平。5.试管夹夹在试管中上部，从试管底部套入、取出，拇指不要按在试管夹的短柄上。

4、6.在滴定时加液要慢，边加边震荡使之充分反应。13五、操作中存在的不足1.待测样品研磨不充分导致的实验误差。2.操作人员不同导致加入药品量的细微不同导致的实验误差。3.不同人员对于颜色的辨别度不同导致的实验误差。4.药品配制后放置时间过长部分变质导致的实验误差。5.水浴加热时间不准确导致的实验误差。14六、提高准确度的方法1.将样品剪碎充分研磨，尤其是叶片部分。2.由同一人加入同系列药品。3.让对颜色敏感的人辨别颜色的变化。4.易变质药品现用现配，其他药品用完后盖好盖子。5.水浴加热时利用秒表定好时间。15七、小组团队合作分工一：李金婷二：

5、张翠敏，张翠敏三：苏鑫四——七：麻弘媛汇总：麻弘媛恶意放狗：麻弘媛ヾ(o◕∀◕)ﾉヾ16谢谢观赏17