细胞生物学实验ppt课件.ppt

《细胞生物学实验ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验内容实验一、细胞的形态结构与显微测量实验二、细胞生理活动的实验观察实验三、细胞核与线粒体的分级分离实验四、细胞分裂的形态观察实验五、细胞原代培养实验六、细胞计数及死活细胞的鉴定实验七、综合设计性实验1实验一细胞的形态结构与显微测量2(一)观察并了解细胞的基本形态。(二)掌握临时制片和显微绘图的方法。(三)了解显微测微尺的原理及使用方法实验目的3(一)材料：人口腔上皮细胞(自取)蛙血细胞涂片人血涂片单层柱状上皮细胞永久制片骨骼肌纵切片实验用品4(二)器材：载玻片盖玻片牙签擦镜纸吸水纸纱布永久制片镜台测微尺5临时制片——口腔上皮细胞标本的制备显微测量永久制

2、片的观察实验内容6usingofthemicroscope(I)Useoflowobjectivelens(II)Useofhighobjectivelens7StructureofthemicroscopeMechanicalpartOpticspartLightingpart89(一)临时制片——口腔上皮细胞标本的制备取载玻片一张(揩净)→加一滴生理盐水→取材(口腔内颊部上皮细胞)→涂于生理盐水中→盖盖玻片→染色(甲基蓝)1’→观察10(二)显微测量1．显微测量计目镜测微尺镜台测微尺11(1)目镜测微尺1.外形是一圆形玻片，装入目镜镜筒中。用于测量标本

3、用。2.刻度标记0~100，实际分为200等份，每一个格的长度需用镜台测微尺标定。12(2)镜台测微尺1.外形是一载玻片，上有一带精细刻度的标尺。2.总长度为1mm，分为100等份，每一个格的长度为0.01mm(10μm)。13(3)标定方法①将镜台测微尺置镜台上。②低倍下找到镜台测微尺，使之与目镜测微尺平行且左端对齐(0刻度重合)。14③由左向右找到目镜测微尺与镜台测微尺重合的位点，分别记录两尺重合处的刻度，计算目镜测微尺每小格的长度。如镜台测微尺1mm处(全长)与目镜测微尺75刻度(150小格)重合，则:目镜测微尺每小格的实际长度=mm=0.0067m

4、m=6.7μm115015④同样的方法标定高倍镜下目镜测微尺每小格的实际长度计算公式如下:目镜测微尺每小格的实际长度＝镜台测微尺长度目镜测微尺格数＝30×10μm20016(4)测量细胞并计算核质比①口腔上皮细胞标本片→低倍镜下选无重叠、伸展良好、结构完整的细胞→换高倍镜测量。②口腔上皮细胞为扁平形(近似椭圆形),测细胞的长半径(直径)，短半径(直径)，计算细胞体积。以同样方法测核并计算核体积(或将核近似看作球形)。③按公式计算核质比。17椭圆V=4πab2/3(a长半径,b短半径)圆V=4/3R3(R半径)V=VnVc-VnVn细胞核体积Vc细胞体积18

5、(三)永久制片的观察19Observationofcellmorphologicalstructurehumanbloodsmeartoadbloodsmearmousesmallintestinepillarepidermalcellskeletonmuscleslide2010x1021.222324erythrocytesleucocyteBloodplatelet25Pillarcell10x40(columnar,dense,elliptical-shapednuclear)Chalice-shaped2627Skeletonmusclecell

6、(fibrous,havemanymyofibril)nuclei28四、作业1．绘制口腔上皮细胞(点线绘图法)2．低倍镜、高倍镜下测微尺的标定方法及结果3．计算核质比29镜台测微尺30目镜测微尺（200小格）31实验二、细胞生理活动的实验观察32通过制片与观察加深理解细胞吞噬等生理活动掌握死活细胞鉴别的原理及方法实验目的331.材料：小白鼠2.器材和仪器：光学显微镜、2ml注射器、载玻片、盖玻片、解剖器材、滴管、牙签、吸水纸3.试剂：1％鸡血悬液、6％淀粉肉汤、0.3％台盼兰、酵母悬液、生理盐水、0.2％亚甲基兰染液实验用品34（一）细胞的吞噬活动（二）

7、细胞活性的鉴定—酵母菌实验内容35白细胞是机体防御系统中能游走的单位。它分为粒细胞系、单核细胞系、淋巴系三类。游走性、变形运动、趋化性、吞噬异物。在白细胞中，以粒细胞、单核细胞的吞噬活动较强，故称此二类细胞为吞噬细胞。单核细胞由血液进入组织后逐渐演变成巨噬细胞。吞噬细胞主要靠吞噬来处理异物。吞噬细胞首先由于趋化作用而向异物游走，然后伸出伪足包围异物，并发生内吞作用形成吞噬泡将异物吞入细胞，继而溶酶体与吞噬泡融合消化异物。1.原理36372.方法a．实验前二天，每天向小鼠腹腔注射6％淀粉肉汤0.5～1ml(含O．3％台盼兰，起标记作用)，以刺激腹腔产生较多的

8、巨噬细胞。b．实验时，每组取一只经上述处理的小鼠，腹腔注射1％鸡血