葡萄、香蕉的组织培养.doc

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1、葡萄.香蕉的组织培养1香妃葡萄的快繁(1)材料与方法供试材料于秋季在田间采集,沙藏后于春季在温室内水培,新梢长2-3cm时剪取茎尖和带芽茎段,在流水中冲洗2~3小时后,用70%酒精浸泡30秒,再用0.1%升汞处理7~8分钟,然后用无菌水冲洗3~4次,每次间隔5分钟左右,以洗净残留的升汞。在无菌条件下将材料接种到培养基中。初代诱导培养用MS做基本培养基。继代增殖和生根培养以1/2MS为基本培养基。上述培养基中均加0.5%琼脂。初代培养基中蔗糖为3%,继代培养基中为2%(以白砂糖替代蔗糖)。pH均调至5.8。温度22

2、~25°C,光强2000lx光照12/do瓶苗根长3~5cm时进行炼苗移栽。(2)结果诱导培养:接种1周左右即有芽萌发。40天后在基本培养基中添加1.Omg/LBA、不加IAA时萌芽数最多,萌芽数达15个,芽长5.1cm。继代增殖和生根:诱导出的芽接入1/2MS附加IBAO.2mg儿时,生根率和增殖系数最高,1个月后平均生根数47条、平均生根率94%、增殖系数5.2>平均根长3.5cm。移栽:苗根长3~5cm时,将瓶移至温室,不揭瓶盖,1周后打开瓶口,3天后用清水洗去根部培养基,将苗移至用0.1%高猛酸钾消过毒的

3、蛭石中,放入温室,其上再搭一塑料小拱棚,少浇水,天晴时适当搭帘遮荫,棚内相对湿度保持在85%左右,其间每隔10天左右浇1次营养液,并逐渐揭帘揭棚,增加光照和通风。1个月后,当苗长出新根时,移至草炭:沙:土=1:1:2的花盆内。室外气候适宜时进行大田移栽,移栽成活率达70%以上。2美人指葡萄组培(1)材料与方法试材品种为美人指葡萄,9月中旬至10月初采取美人指葡萄带有冬芽的夏芽副梢,剪取距顶端3~5节的茎段,采后立即去掉叶片,用自来水冲洗1~2h再用洗洁精稀释液洗涤枝条4~6次,在无菌条件下用70%酒精浸泡30s,

4、用0.1%升汞溶液浸泡16-18min,再用无菌水冲洗5~6次,将枝条剪成带1个冬芽的茎段,长约1~2cm,接入初始诱导培养基中。当萌发的苗长到1~2cm时,接入增殖生根培养基中进行继代培养,当长到3~4cm时,再次进行继代或移栽。初始诱导、增殖生根基本培养基为B5。培养基中均加入3%蔗糖,0.6%琼脂,pH6.0。培养条件为光照强度2500lx,16h/d,温度25-27C。试管苗移栽前要练苗。苗高达瓶口,当试管苗根长达3~4cm,有3~4枚正常叶片时,连同培养瓶转入日光温室内,开瓶在温室中自然光下炼苗3~7d

5、,当从瓶口伸出油亮的叶片且幼茎呈淡红色时即可出瓶,然后在能调节温度的沙床上炼苗,阴天或傍晚,将培养瓶内的幼苗倒出,洗去根上附着的培养基,栽入沙床后,盖好临时塑料小拱棚。最初3d,小拱棚内温度保持的25±2°C,最高不超过30°C,最低不低于20°C,相对湿度保持在90%-95%»光照为7x1CP~1x104lx,夜间或阴天要人工补充光照,3d后,降低棚内湿度到70%~80%,光强逐渐增加到4x104lx。6~7d后完全拆除临时小拱棚。最后进行温室营养钵炼苗,经沙培的合格苗,小心挖出,在空气湿度不低于70%,温度不

6、高于20-25°C,无直射光下,栽入肥:沙:腐熟有机肥1:1:0.2的营养钵中。栽于营养钵中的苗,扣小拱棚的最初几天,温度、湿度、光照的要求和管理同沙培苗。大田苗圃移栽。选疏松肥沃、排灌水方便、距温室较近、日照良好的地块做为苗圃地。按一般营养钵苗进行移栽及管理即可。移栽于苗圃地的幼苗应保证有3个月的生长期,并及时打顶去副梢,促进枝芽成熟。(2)结果最佳启动萌芽培养基:B5+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂,pH5.8~6.0,3d开始萌芽,平均3芽,10d后芽长1.8cm最佳增

7、殖生根培养基:Bs+IBA0.5mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂,pH5.8~6.0,增殖率5.5,生根率达98%。香蕉的组织培养1香蕉的组织培养(1)材料方法台湾引入的香蕉品种。选果梳整齐、果实大小均匀、产量高、无病虫害症状的健康母株的吸芽(注:吸芽苗是从地下球茎上萌发、生长成苗的各类苗的总称,可以分为:褛衣芽,秋后春前发生的吸芽,是传统无性繁殖春植最好的种苗;红笋,春暖后露出地面的吸芽,因其色泽嫩红而得名,是3月至5月定植的常用种苗;隔山飞,收获后植株球茎上长出的吸芽;大叶芽,收获后的隔年旧球茎上抽出的吸芽,

8、通常不宜用作种苗,。挖取吸芽时,宜稍靠近母株,在早春与秋季干旱季节采芽。从蕉园采取的吸芽用自来水冲洗干净,用不锈钢解剖刀切去吸芽的根和顶端,剥去外层,切成高3cm的圆柱体,在超净工作台上,用75%的酒精消毒2min,再用0.1%的高汞消毒15-20min.消毒液应浸没圆柱体,并经常翻动圆柱体,以便充分灭菌。消毒后,立即用无菌水漂洗5次,冲净消毒液。初代培养:用解剖刀剥除外

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