浅谈葡萄组织培养的商业化生产

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1、浅谈葡萄组织培养的商业化生产张荣锋（广西职业技术学院农业技术工程系2002级应用生物技术专业）摘要：木文介绍了葡萄组织培养的工厂化育苗的厂区设计及生产技术过程。葡萄的组织培养工厂化育苗的厂区有：组培工厂生产区有洗涤室、准备室、接种室、培养室、炼苗室和移栽人棚；采用葡萄的幼嫩枝条的顶芽或者节段作为外植体，经过诱导分化形成无菌的无根苗，并不断的扩大繁殖培养，促进芽的增殖，再通过生根培养与移栽，从而获得大量的葡萄劝苗。生产工艺流程；培养基配制、外植体的选材、外植体的处理和灭菌、接种和培养、继代壮苗和增殖、生根培养、移栽五个阶段；需要注意的是苗增殖转接操作、培养条件的控制、污染和污染苗的处理问题

2、，育苗过程的淋水与施肥问题。关健词：葡萄组织培养快繁工厂化育苗前言：葡萄是多年生藤木浆果果树，属于葡萄科葡萄属植物，栽培遍及五大洲，世界上栽培而积达1000万公顷，占世界水果产量30%以上，仅次于柑橘位置第二。葡萄一年四季在食品市场上都可以见到，它的果实美观艳丽，肉质柔软多汁，风味酸甜可口，营养价值很高，是人们喜爱吃的鲜食水果。它述可用于酿酒、制干、制汁等贮存食用，也是一种重要的食品工业原料。葡萄组培快繁主要用于稀缺良种（新育成、新选育出的单株或者新引进的良种等）快繁，以便能够在短期内满足生产上的需求。因此，葡萄的育苗生产有一定的经济市场前景，可是当前葡萄生产屮存在的一些较为严重的问题，

3、尤其是在农村种植的小户。一是：种质退化；二是：带病严重；三是:传统的繁殖方式（扑插、嫁接与压条等）速度缓慢，给优良品种的生产、发展带来极人的不利。在这种情形之下，利用现代生物技术的离体快繁技术就是很好的解决了这些问题。虽然葡萄的生产所面临的问题或许现在人们还没有完全意识到，但如何解决产量、品质和价格问题，将很快成为主要矛盾，又特别是今天我国已加入WTO和中国一东盟自出贸易区的零关税协议的生效，将会更凸显得重耍。通过组织培养的方法解决脱毒问题和恢复其优良的种性，将会成为一条必走的选育途径。现对葡萄组织培养的商业化大生产的过程作一介绍:1.组培工厂生产区整个组培工厂生产区主要有洗涤室、准备室

4、、接种室、培养室、炼苗室、移栽大棚等组成。1.1洗涤室用于完成玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。1.2准备室通风、明亮的准备室内要完成培养基制配（包括培养基母液的制配），培养基分装、灭菌和材料的预处理等准备工作。1.3接种室是进行植物材料的分离接种及培养物转移的一个重要操作室。内设有大约2m2的缓冲道，缓冲道中备有衣栢或衣钩，便于接种操作人员进出时更衣使用。接种室一般以大小为宜，安装有7台封闭式超净工作台，可供给14个人同时操作生产。1.4培养室是培养组培苗生长的地方，内设冇放置培养瓶大量的培养架、温度和光照明调控控制器等条件。如空调、H光灯等。在商业化大批量生产屮，因组培苗品样多样化，

5、各品种间生理生长条件要求各不一，这就还要建立有多个条件环境不一致的培养室。1.5炼苗室采用走道、阳台等尽可能可用的空闲且又不影响行人交通等的地方或者是玻璃室，如果还有一些散射的太阳光线更佳。在自然强光散射光的照射下，培养锻炼培养组培幼苗，为下一步的移栽作好准备。1.6移栽大棚采用塑料大棚，大棚四周下半部的塑料可用人工或机械自动半自动开启与关闭，以便于调控棚内的温度。地面上可起水泥槽或无的栽培床。棚内可设有口动或半口动灌溉系统，也可采用人工灌溉，如花洒桶等。2.生产工艺流程：选材f外植体预处理I培养基配制f灭菌f培养基f接种f培养f单芽或丛生芽I岀售一移栽育苗一炼苗一生根苗一无根苗一继代增

6、殖培养3.快繁技术要点3.1培养基的配方分化培养基:1/2无机盐MS+BAi.i~i.3+NAAo.oi+LHioo+2%糖+琼脂，PH5.8继代与壮苗培养基：1/2无机盐MS+BA0.5-0.7+NAAo.oi+LH1Oo+2%糖，PH5.8生根培养基：1/2MS+IAAq.4+BA0.06+琼脂，PH5.83.2外植体的选材以生长旺盛且无病的新梢顶端作为外植体，取2-5cm的茎尖为最佳.3.3外植体的处理和灭菌去除幼叶,用自来水将尘土冲洗1・2小时，滤干水，于超净工作台上用75%酒精润洗15秒钟后，再用0.1%升汞溶液进行浸泡，摇动消毒8分钊最后用无菌水冲洗5次,每次2分钟即可。3.

7、4接种和培养将已消毒好的外植体，把枝条原切口处剪掉，使之露出新切口，同吋剪切成1.0-2.0cm长的小段，每一小段都带有一个茎节，这样有利于芽的快速分化长出。将切出的小段，于芽朝上插入到芽分化培养基上。枝条以插入培养基刚稳为宜，每瓶接种一段，迅速盖好瓶盖，移至培养室内培养。培养条件为：温度24-28°C,光照强度1800LX,光照时间每天10个小时。经过约15天培养后，就可见到不定芽长出。当不定芽长至约0.5cm以上时，就可将小苗转