人宫颈癌组织放射治疗后原癌基因c┐fos的表达.doc

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1、人宫颈癌组织放射治疗后原癌基因C-]fos的表达作者:石梅,魏丽春,马海昕,杨守京,陈良为【关键词】c-fos关键词:C-fos;宫颈肿瘤;放射治疗摘要:冃的探讨放疗前、后人宫颈癌组织原癌基因C-fos表达的变化及意义.方法取临床确诊为宫颈鳞状细胞癌患者的活检组织标本共18例,其中放疗前8例,放疗后10例,在多聚甲醛固定的活检癌组织冰冻切片上,进行Fos蛋白的免疫组织化学染色.结果放疗前的宫颈癌组织内,多数癌细胞呈Fos免疫染色阳性;照射(30〜40Gy)后的宫颈癌组织Fos免疫染色显著降低(P<0・01),多数癌细胞无Fos染色,但放疗前、后间质细

2、胞的Fos免疫反应无明显变化.结论放射明显抑制宫颈癌细胞的Fos表达,Fos的表达状态可作为放射治疗中评价宫颈癌细胞增殖的分子指标2一・Keywords:c-fos;cervixneoplasms;radiotherapyAbstract:ATMToinvest!gatechangesofc-fosoncogeneex-pressioninthehumancervicalcancerfollowingirradiationandelucidateitssignificanceinradiotherapy.METHODSEighteencervicalcan

3、cerbiopsytissuesweretakenfrompa-tientsdiagnosedwithsquamouscervicalcancer,inwhichtenweretreatedwithradiotherapy;Immunohistochemicalstain-ingwasperformedforFosproteininformalin-fixedfreezingsections.RESULTSThemajorityofcancercellsshowedFos-iinmunoreactivit.y(Fos~IR)beforeirradiatio

4、n.Followingirradiation(30〜40Gy)Fos-immunoreactivitydecreasedre-markably(P&It;0.01),andFos-immunopositivestainingwashardlydetectedinmostofcancercells.NoobviouschangeinFos-immunoreactivity,however,wasseeninmesenchymalconnectivetissuefollowingirradiation.CONCLUSIONIrra-diationinhibit

5、sFosexpressionincervicalcancercells.Thepresentresultsalsosuggestthatc-fosoncogeneexpressionmayberegardedasamolecularmarkerforvaluingthecancercellproliferationduringradiotherapyofhumancervicalcancer・0引言宫颈癌是人类多发性恶性肿瘤,严重危害中、老年女性的健康•放射治疗対宫颈癌具有明确有效的治疗效果•因此,探讨宫颈癌的放射生物学机制,如在细胞分子水平的变化规律,对

6、于提高肿瘤的整体放射水平可能具有重要的借鉴意义•研究表明Fos在宫颈癌组织中有表达[1,2],但它是否能反映放疗对癌细胞的增殖状态,目前还未见报道•因此我们利用免疫组织化学方法,探讨了放射治疗中宫颈癌组织Fos的变化及具意义.1材料和方法1.1材料宫颈癌活检组织标本18例(n二18),取自临床病理诊断为磷状细胞癌患者,病理分级为I〜II•年龄36-56岁•其中,放疗前标本8例,放疗后标本10例•接受放射治疗的患者分别为15-20次(30〜40Gy)・宫颈癌活检组织标本,入40gL-1多聚甲醛,0.ImolL-l磷酸缓冲液(PB,pH7.4),4°C下固定2

7、4〜48h,然后换入30gL-1蔗糖溶液内,4°C下过夜•冰冻连续冠状切片,切片厚10pm,切片按顺序分为数套,置于-20°C保存备用.染色前将切片晾干,然后分别作常规HE染色、Fos免疫组化染色和对照染色.1.2方法切片于lOmmolL-1PBS内洗lOmin,再入含0.3mLL-1过氧化氢溶液内处理30min,用以灭活内源性过氧化物酶•经卩BS洗后,入兔抗Fos多克隆抗体(15000,CALBIOCHEM,用含2mLL-1正常山羊血清和0.ImLL-1TritonX-100的PBS稀释,1100)内,于4°C下孵育48h・然后入bi-otin标记的羊抗

8、兔TgG(1200,Vector公司)溶液内,室温下放置4h・入A

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