实验一可溶性还原性糖.脂肪和蛋白质的检测.ppt

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1、实验一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、实验原理可溶性还原糖＋蛋白质＋脂肪＋斐林试剂双缩脲试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液橘黄色红色紫色颜色反应水浴加热可溶性还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖（蔗糖、淀粉都没有还原性）二、几种重要的试剂斐林试剂甲液（0.1g/mL的NaOH溶液）乙液（0.05g/mL的CuSO4溶液）现配现用等量混合均匀双缩脲试剂A液（0.1g/mL的NaOH溶液）B液（0.01g/mL的CuSO4溶液）现配现用先加A液再加B液三、实验材料还原糖鉴定：浅色、白色且富含还原糖的材料，如苹果、梨、白萝卜的匀浆（西瓜汁、甘蔗

2、不符合）蛋白质鉴定：稀释蛋清液、牛奶、豆浆等脂肪鉴定：花生子叶徒手切片四、实验方法与步骤1、可溶性还原糖的鉴定(1)制备组织样液：苹果洗净、去皮、切块→取5g加少许石英砂研磨→加5mL水再研磨→漏斗垫纱布后过滤，得到样液(2)鉴定样液：取2mL样液于试管中→注入2mL刚配制的斐林试剂，振荡混合（淡蓝色）→水浴煮沸2min左右，观察溶液颜色变化（先变为棕色，再变为砖红色）2、脂肪的鉴定(1)切片制作(2)染色：在花生子叶切片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液→2～3min中后，吸去染液→滴体积分数为50％的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精，再滴1～2滴

3、蒸馏水，盖上盖玻片(3)镜检鉴定：在低倍物镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处，移至视野中央→转动转换器，换用高倍物镜观察（脂肪滴:橘黄色的圆形小颗粒）3、蛋白质的鉴定(1)制备组织样液：浸泡黄豆1～2d→去皮、切成薄片，加少许石英砂及5mL水研磨→漏斗垫纱布后过滤，得到样液（用蛋清要稀释10倍以上，否则实验后黏住试管壁不易洗净）(2)鉴定样液：取2mL样液于试管Ⅰ中→加入2mL双缩脲试剂A液摇匀（造成一个碱性环境）→加入双缩脲试剂B液3～4滴，摇匀，注意颜色变化（溶液变为紫色）。五、注意事项良好的实验材料是实验成功的一半斐林试剂和双缩

4、脲试剂的配制、使用方法和用途。脂肪的鉴定，把化学反应和显微镜观察结合起来，也称为显微化学反应。