课时5:鉴定生物组织中的还原性糖、脂肪、蛋白质

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1、课时五:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质【学习冃标】1.掌握检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的方法。【学习重难点】尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。导学活动课程内容(教师集体备课部分)教师二次备课(洋生笔记)补充内容导学活动过程内容(集体备课部分)一、实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的冇关冇机化合物产生特定的颜色反应。因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的存在。1.淀粉遇到牛成的复合物。2.糖中的还原糖(如、、麦芽糖),与(新制Cu(OHL)发生作用,可以生成(Cu,0)o3

2、.脂肪可以被染液染成(或被苏丹IV染液染成色)。4.蛋白质与发生作用,可以产生紫色物质。建议考虑:还原性糖检测原理:新配制的氮氧化铜(Cu(0H)2)与可溶性的还原性糖(衙萄糖、果糖和麦芽糖等)在水浴加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜(CU2O)沉淀。蛋白质检测原理:加入A液:0.lg/mLNaOH后,试管中溶液呈碱性,肽键与C屮形成紫色的复杂化合物。二、材料用具:1.实验材料:苹果或梨匀浆、马铃薯匀浆、花生种子、花生种子匀浆、豆浆、新鲜肝脏研磨液。1.用具:双面刀片,试管(最好用刻度试管),试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,

3、三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜。2.试剂:斐林试剂,苏丹III染液或苏丹IV染液,双缩嫌试剂,体枳分数为50%的酒精溶液,碘液,蒸镉水。试剂成分方法是否加热结果斐林试剂甲液:0.lg/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSOi(质量浓度)双缩麻试剂A液:0.lg/mLNaOHB液:0.Olg/mLCuSO,(质量浓度)三、方法步骤:(一)淀粉的检测和观察:%1.取一只洁净的试管,向试管中加入2mL马铃薯匀浆。%1.向试管中加入2滴碘液,观察颜色变化。(二)还原性糖的检测和观察:%1.取一只洁净的试管,向试管屮加入加L待测

4、组织样液(苹杲匀浆或梨匀浆)。%1.向试管屮注入ImL斐林试剂(甲液和乙液等量混合后再注入)o%1.将试管放入盛有50~65°C温水的大烧杯中加热约2分钟。%1.观察试管中出现的颜色变化。(三)脂肪的检测和观察:方法一:向待测组织样液(花生种子匀浆)中滴加3滴苏丹III染液,观察颜色的变化。方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)。取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。切片:用刀片在花生了叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿待用。制片:从培养皿中选収最薄的切片,用银子挑取放在载玻片中央;在花生子叶薄

5、片上滴2〜3滴苏丹III染液,染色3min;(如果用苏丹IV染液,染色1min)用吸水纸吸取染液,再滴加1〜2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色;用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馅水,盖上盖玻片,制成临时装片。观察:在低倍显微镜下找到花住子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清楚;换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。(四)蛋白质的检测和观察:%1.取一只洁净的试管,向试管中加入2mL待测组织样液(豆浆等)。%1.向试管中注入双缩豚试剂A液5L,摇匀。%1.向试管中注入双缩腺试剂B液4滴,摇匀。%1.观察试管中出现

6、的颜色变化。【理解】1.苹果汁、梨汁、西瓜汁、橙汁等材料那些可溶性述原性糖检测的材料?应当选择什么样的实验材料?2.检测还原糖时,斐林试剂的使用要注意什么问题?实验的条件?试管内颜色变化是怎样的?3.检测蛋口质时,双缩腺试剂的使用方法?实验现象?若加入较多的B液对实验彫响?4.检测蛋白质吋,若实验材料使用的是蛋清,耍注意的问题是什么?为什么?1.在脂肪检测时,染色后滴加酒精的作用是什么?1.脂肪检测时,若在观察玻片时,发现有的地方很清晰,有的地方细胞重叠,模糊不清,原因是什么?教师总结:用斐林试剂,鉴定糖尿病患者的尿液中是否含有葡萄糖。用双缩腺

7、试剂,鉴定肾病患者的尿液中是否含有蛋口质等。【反馈】1.鉴定可溶性还原糖、蛋口质、脂肪所用实验材料较合理的一组是()A.韭菜叶、豆浆、大豆B.梨、鸡蛋清、花生子叶C.西瓜、花生子叶、人豆D.番茄、豆浆、花生子叶2.青苹果遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂反应,产生砖红色沉淀,这说明()A、青苹果中含淀粉不含糖类B、熟苹果中只含糖类不含淀粉C、苹果转熟时淀粉水解为述原糖D、苹果转熟时单聚糖合成淀粉3.下列有关颜色反应实验的叙述,正确的是()A.成熟番茄和成熟西瓜均含有较多的果糖和蔗糖等还原糖,但不适合用丁还原糖的鉴定实验B.利川花牛的纽织样液或组

8、织切片进行脂肪鉴定实验时,需丿IJ显微镜才能观察到相应的颜色C.蛋口质与双缩腺试剂作用,颜色变化为浅蓝色一紫色,该过程不需要水浴加热处理D.还原糖鉴定

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