新型重组类人胶原蛋白医学及其应用.ppt

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1、新型重组类人胶原蛋白及其应用┃Human-likeCollagen类人胶原蛋白胶原蛋白传统提取方法的问题国内外重组胶原蛋白概况类人胶原蛋白研发背景胶原蛋白传统提取方式和面临的问题[1]He

2、ckeT．Gelatin，Thefoodtechnologist’sfriendorfoe．InternationalFoodIngredients．2000．1，6-8．病毒隐患动物源疾病(如瘟疫、禽流感等)或人体传染病(如病毒性肝炎和艾滋病等)病毒的传染危险[2]排异反应异种或异体排斥反应,导致植入部位无菌性炎症以及细胞数量和形态改变细胞毒性不溶于水，加工过程中所用的酸、碱、盐溶剂很难脱除

3、完全,产生细胞毒性，并降低细胞粘附性制备方法：○酸水解法○碱水解法○酶解法原料来源：猪/牛/驴/鱼等动物的结缔组织123类人胶原蛋白研发背景FDA、欧盟对动物源胶原蛋白医学应用的限制[2][3][4]Cooperman,L.andMichaeli,D.,1984,Theimmunogenicityofinjectablecollagen.I.A1-yearprospectivestudy.JAmAcadDermatol,10:638-646.Lee,C.H.,Singla,A.andLee,Y.,2001,Biomedicalapplicationsofcollagen.IntJ

4、Pharm,221:1-22.Olsen,D.,Yang,C.L.,Bodo,M.,Chang,R.,Leigh,S.,Baez,J.,Carmichael,D.,Perälä,M.,Hämäläinen,E.R.,Jarvinen,M.andPolarek,J.,2003,Recombinantcollagenandgelatinfordrugdelivery.AdvDrugDelivRev,55:1547-1567.寻找一种安全、有效并具有良好生物功效的胶原蛋白类材料在组织工程、医药美容等领域受到越来越广泛的关注国外重组胶原蛋白的研究现状2000年MyllyharjuJ等人使

5、用甲基酵母表达生产准人纤维胶原蛋白Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型[5]1998年NokelainenM等用两种杆状病毒转染昆虫细胞生产类人特异性软骨胶原II型[6]2001年NokelainenM等使用四种人类基因报道了使用甲基酵母高水平表达I型前胶原[7]UittoJ等从人皮肤细胞体外培养中得到了Ⅰ，Ⅲ型前胶原[8]VaughnPR等在啤酒酵母中表达出了携带有羟基化片断的类人Ⅲ型胶原蛋白[9]由于哺乳动物细胞和昆虫细胞培养成本高,周期长,重组胶原蛋白表达量极低(1%左右)，培养只能限于实验规模,不可能满足产业化、大批量的需求[5]MyllyharjuJ，NokelainenM，Vuorela人K

6、ividkkoKI．ExpressionofrecombinanthumantypeI-IIIcollagensintheyeastpichiapastoris．BiochemSocTrans．2000．28(4)，353-7．[6]NokelainenM，TuH，Vuorela^NotbohmH，KivirikkoKI,MyllyharjuJ．High-levelproductionofhumantypeIcollagenintheyeastPichiapastoris．Yeast．2001J蚰30．18(9)．797-806．[7]NokelainenM，Helaakoski

7、T，MyllyharjuJ，NotbohmH，PihlajaniemiT'FietzekPP，KivirikkoKI．ExpressionandcharacterizationofrecombinanthumantypeIIcollagenswithlowandhighcontentsofhydroxylysineanditsglycosylatedforms．MatrixBi01．1998Jan．16(6)，329-38．[8]UittoJ，BoothBPolakKL．CollagenbiosynthesisbyhumanskinfibroblastsIIIsolationan

8、dfurthercharacterizationoftypeIandtypeIIIprocoUagenssynthesizedinculture．BiochimBiophysActa．1980Aug21．624(2)，545—61．[9]VaughnPR，GalanisM，RichardsKM，TebbTA，RamshawJA，WerkmeisterJA．Productionofrecombinanthydroxylatedhumantype1IIcollagenfragment