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时间:2020-03-13
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1、3.1菊花的组织培养(一)、植物组织培养的基本过程1.理论基础:________________。2.细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在_____、结构、生理功能上出现_____________的过程。细胞的全能性形态稳定性差异一、基础知识3.过程:______的植物组织或细胞脱分化,愈伤组织再分化,根、芽→完整植株。离体离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根、芽植物体植物组织培养的基本过程移栽(1)愈伤组织的特点:细胞排列疏松而无规则,是高度_________的呈无定形状态的_______细胞。(2)脱(去)
2、分化:由高度分化的植物组织或细胞产生_________的过程。(3)再分化:__________继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。(4)如何控制细胞的脱分化与去分化?液泡化薄壁愈伤组织愈伤组织阅读32页解决下列问题:通过激素控制1.外植体的选取△不同植物的组织培养难度___________差别很大如烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导比较难如菊花的组织培养,一般选择_____________植株茎__________________________。△对于同一种植物材料,材料的_________、__
3、________________等也会影响实验结果。年龄保存时间的长短(二)影响植物组织培养的因素未开花上部新萌生的侧枝外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。思考在选取菊花茎段的时候,为什么要选取生长旺盛的嫩枝?2.培养基的配制常用的一种培养基为___________其主要成分包括:______元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S______元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co__________:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等______
4、_____:生长素、细胞分裂素、赤霉素等MS培养基大量微量有机物植物激素思考各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养。在植物组织培养的过程中,为什么需要无菌操作?思考植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养
5、的培养基同样适合于某些微生物的生长。使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于______,但_________先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用___________提高细胞分裂细胞不分化分化频率3.植物激素植物激素中_______和___________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_______________、_____________以及__________等,都会影响实验结果。生长素细胞分裂素植物激素的浓度使用的先后顺序用量的比例生长素/细胞分裂素比值高时促进_____
6、_,抑制_________生长素/细胞分裂素比值低时促进______,抑制_________生长素/细胞分裂素比值适中时促进____________根分化芽形成芽分化根形成促进愈伤组织生长使用量实验结果4.环境因素(pH、温度、光照)不同的植物对各种条件的要求往往______。如进行菊花的组织培养,一般将pH控制在______左右;温度控制在__________;并且每天用日光灯照射_____。不同5.818~22℃12h5.无菌环境在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境。无菌技术包括对______和___________
7、_的消毒灭菌培养基外植体制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培移栽二、实验操作(一)制备MS固体培养基实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备1.配制各种母液配制母液时,大量元素浓缩__________,微量元素浓缩__________,常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。1mg/ml410倍100倍二、实验操作2.配制培养基。植物激素在菊花组织培养中,可以不添加____________
8、_____,原因是菊花茎段组织培养___________________。比较容易①配制培养液②调PH③培养基的分装3.灭菌将分装好的培养基连同其他器械一起进行_________________。高压蒸汽灭菌(二)外植体消毒将菊花嫩枝茎段用流水冲洗后,用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,先用
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