专题3课题1菊花的组织培养(导学案).doc

《专题3课题1菊花的组织培养(导学案).doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、雅园导学案课题1菊花的组织培养☆预习案☆专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养编辑者：王有泽预习目标1、归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基。预习重难点2、熟悉植物组织培养的过程；掌握植物组织培养的灭菌技术。植物组织培养过程中使用的无菌技术。一、教材导读一、细胞的分化1．细胞分化的概念：在植物的个体发育过程中，细胞在、和发生稳定性差异的过程。（1）持久性：细胞分化贯穿于整个生命过程中。2．细胞分化的特点（2）不可逆性：一般来说，已分化的细胞不会再变回原来的细胞。（3）普遍性（4）遗传物质不变性3．条件：（1）离体（2）外界环境条件适宜：

2、适宜的营养物质、激素和其他外界条件。4．细胞分化的原因即实质：是基因在时间和空间上选择性表达的结果。1.定义：指已分化的细胞在一定条件下，具有发育成完整的潜能。2.具有全能性的原因：生物体的每一个活细胞都含有该物种的遗传信息。二、全能性3.全能性表达的条件：离体、营养物质、激素、适宜的条件。4.作用：植物组织培养的理论基础。三、植物组织培养的概念1.概念：指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称：植物离体培养。2.基本过程（1）脱（去）分化：由高度分化的植物组织

3、或细胞产生的过程。（2）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化出和等器官，形成完整植株。注意：愈伤组织细胞的特点：细胞排列疏松、无规则、高度液泡化、薄壁细胞。细胞脱分化与去分化的控制方法：通过激素控制。四、影响植物组织培养的因素：（1）不同植物的组织培养难度不同---烟草、胡萝卜容易，枸杞难。1.外植体的选取(内因）（2）同一种植物的不同组织培养难度不同，材料的年龄、保存时间等也影响。（3）菊花组织培养：一般选择植株的茎上不新萌生的。2.外因——四大营养条件与植物激素条件。（1）营养条件：适宜的培养基---常用MS培养基，主要成分包括4大条件：大量元素：

4、等9种；微量元素：等8种；有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等；植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。（2）植物激素：①生长素、细胞分裂素的使用顺序：生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。6雅园导学案课题1菊花的组织培养使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于细胞，但不利于分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高结论：植物激素中和是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。②生长素、细胞分裂素使用量---二者用量的比例影响植物细胞的方向。生长素/细胞分裂素比值结果比值高时，大于1促分化，抑芽形成比值低时，小于1促

5、分化，抑根形成比值适中，等于1促进愈伤组织形成结论：植物激素的、使用的顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。（3）环境条件：温度、PH、光照等。菊花的pH=5.8，温度控制在18—22℃每日光照12h。五、实验操作步骤：一、MS固体培养基的配制→二、外植体消毒→三、接种→四、培养（1、愈伤组织的培养；2、愈伤组织的继代培养；3、试管苗的培养。）→五、移栽→六、栽培（一）MS固体培养基制备1．配置各种母液——含多种营养成分，一般在下保存。①无机物中大量元素浓缩______倍，微量元素浓缩______倍，常温保存。②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml

6、的质量浓度单独配制成母液。③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。2．配制培养基步骤：先水+琼脂→融化→再加母液（配好的含、、和）→加蒸馏水至1000mL→调PH→分装如锥形瓶。注意：由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素。3．灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽。（二）外植体消毒1．选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝。2．消毒①流水冲洗：菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右。②酒精处理：用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动______次，持续____

7、__s，立即将外植体取出，在中清洗。③消毒液处理：取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗______次，漂净消毒液。（三）接种①接种前，用体积分数70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用灭菌。②将消过毒的菊花茎切成小段。③插入时注意方向，忌倒插。（四）培养接种后的锥形瓶最好放在__________中培养。培养期间定期消毒，温度控制在18-22℃，并且每天用日光灯光照12h。（五）移栽：一用清水冲洗根部培