实验四 愈伤组织诱导与继代培养.ppt

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1、实验四愈伤组织诱导与继代培养愈伤组织诱导、继代、分化过程消毒12取材3诱导4继代5分化一系列问题??1.何为愈伤组织?原指植物受创伤伤口附近产生的薄壁组织,泛指经细胞与组织培养产生的可传代的未分化细胞团。2.愈伤组织如何获得?分化:在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程。脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。脱分化实质:恢复细胞的全能性过程。很多情况下,单独使用2.4-D就可成功地诱导愈伤组织的发生。再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程

2、。3.愈伤组织的分类?胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织。4.愈伤组织继代增重的计算?继代5.胚性愈伤组织如何分化成苗?一、实验目的2.了解胚性愈伤组织的形态特征、分化过程。1.掌握愈伤组织诱导的方法。二、实验原理组织培养物的分化、脱分化、再分化是基因选择性表达和关闭的结果。三、实验操作(一)愈伤组织诱导1.实验材料:箭叶秋葵幼苗叶片2.诱导培养基配方:MS+2,4-D1mg/L+KT0.1mg/L+琼脂粉5.5mg/L+糖30mg/LpH6.01L3.操作步骤3.1铺开无菌纸,用剪刀将培养瓶中的箭叶秋葵子叶叶片对分。3.2接种至诱导培

3、养基上。3.3贴上标签,记录姓名、日期。(二)愈伤组织继代1.实验材料:箭叶秋葵愈伤组织2.继代培养基配方:MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L+琼脂粉5.5mg/L+糖30mg/LpH6.01L3.操作步骤2.1将大块愈伤组织置于无菌纸上。3.2手术刀切成黄豆粒大小。3.3贴上标签,记录姓名、日期。

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