欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:50184497
大小:174.50 KB
页数:8页
时间:2020-03-09
《临床免疫学—-1免疫印迹检测ENA抗体.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、免疫印迹法检测ENA抗体临床免疫学检验教研室实验目的掌握免疫印迹方法的基本原理、检测ENA抗体的基本操作方法;自身抗体的其它检测方法和相关的临床意义。实验原理酶免疫印迹抗原SDS-PAGE电泳/转膜(点膜)免疫反应(加一抗/二抗)显色试剂和器材1.待测标本;2.检测用膜载体;3.浓缩液;4.酶标二抗;5.显色底物A/B;6.终止液。实验步骤1.配制工作液:按1:10的比例稀释浓缩液.(10ml);2.向每一反应槽孔加入0.5ml工作液和1份测试条,温育1~2分钟;3.向每一反应槽孔加入待测血清10μl,充分混匀,摇床上反应30分钟;4.弃去槽
2、内液体,加入1ml工作液,洗涤1分钟,重复洗涤4次;5.加入0.5ml工作液,酶标二抗20μl,充分混匀,摇床上反应30分钟;6.同第3步洗涤;7.加入显色液A/B各0.5ml,室温反应10分钟;8.每槽加入终止液0.5ml,混匀,1分钟后弃去槽内液体,用蒸馏水洗涤3次;9.取出测试条,自然干燥后进行结果判定。结果判断1.测试条蓝线与标准谱带“0”线对齐;2.测试条蓝线下方的第一条区带为质控线;3.带型分析。注意事项1.标本溶血、黄疸、高血脂;2.试剂盒使用前恢复至室温;3.取测试条时防止损坏膜上抗原。思考题1.自身抗体、ANA、ENA、抗E
3、NA抗体的联系和区别?
此文档下载收益归作者所有